厭氧培養箱操作規程如下:
一、操作室厭氧環境形成
1. 按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內放入二個無毒塑料袋。
2. 通電源開照明燈,開控溫儀,調節所需溫度及安全溫度。
3. 操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。
4. 關緊取樣室內外門,并抽真空校驗。
5. 操作室內置換(氮氣置換) :
(1)先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一頭插入塑料袋。
(2)接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,然后扎緊袋
口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
(4)把塑料袋內氮氣漸漸地放于操作室內,至全部放出。
6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充
氮過程,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
7. 操作室第三次置換(混合氣體置換) : (混合氣體配為:N2:H2:C02=85%:10%:5%)(1) 調換氣路打開混合氣
道通閥門進氣,充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣。
(2) 混合氣充滿塑料袋后,關掉混合氣直通閥(三通閥),使混合氣經過流量計輸入操作并調整流里計,流量為每分鐘10毫升左右。
(3) 把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
(4) 通過三次換氣后,操作室內氣體含氧里已處于極微量狀態。
8. 操作室內打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,- -小時后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變**況,不變色為操作室內達到厭氧環境。
9.開紫外線燈,室內進行處理。**時間自定。厭氧培養箱操作規范和技術參數。
二、菌種的置入和培養1.檢查取樣室內門并關緊。
2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關上外門。
3.取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復零位后進行下次操作。
4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
5. 取樣室內外門開
啟,關緊要抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗及幫助操作。
6. 厭氧培養箱需要長期連續使用的條件:
(1) 每天在操作室內打開美蘭指示劑觀察,正常情況下使用。如不正常就必須重新換氣。
(2)要長期連續輸入微童的混合氣體,使補進的氫氣能和微里的氧結合通過催化吸收,保證了室內厭氧狀態,補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3) 連續培養運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
7.接種棒**器的應用:
(1) 隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行 (接種棒)
(2) 熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉熔蠟。
8. 操作室里的培養箱內的溫度可任意選擇和控制。
9. 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整:
調節減壓閥,使輸出壓力為0. 1Mpa左右。