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ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)時(shí)需要注意

時(shí)間:2017/8/21閱讀:354
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ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)時(shí)有幾個(gè)問題需要注意:
一、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無從談起。
二、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度。三、采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。
四、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí),應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對(duì)低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性。
五、標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。
六、做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng),但一般來說,相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,對(duì)于有些實(shí)驗(yàn),至少要0.99甚至是0.999。
 

ELISA試劑盒血清滅活處理步驟:
① 選用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè)。
② 對(duì)照瓶?jī)?nèi)放入與血清等體積的水。
③ 溫度預(yù)試:對(duì)照瓶?jī)?nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(jì)(保證測(cè)試溫度的準(zhǔn)確性),放入水浴箱中,接通電源,調(diào)節(jié)溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
④ 血清滅活:血清瓶與帶溫度計(jì)的對(duì)照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計(jì)所示溫度上升至56℃時(shí), 定時(shí)30分鐘。
⑤ 大瓶血清滅活后,進(jìn)行分裝。
⑥ 保存。

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