ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物)。
大部分ELISA試劑盒檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應用。因為雖然是相同的抗原,可能兩次包被不一樣。
如果是同一批板,出現(xiàn)這種情況只能說明你的酶標二抗失活了,買新的二抗,按說明書上的稀釋倍數(shù)稀釋;陰性對照有顏色很可能是沒封閉好。陽性值是由你的抗原抗體間親和力決定的,增加抗原抗體用量,或提高二抗?jié)舛?,但靈敏度可能會降低,你可以重新摸下工作濃度;ELISA試劑盒中捕獲抗體與檢測抗體(不論多抗還是單抗)的配對很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點,為此我們就需要確保捕獲抗體和的抗原表位不存在重疊。
ELISA試劑盒如果捕獲抗體和檢測抗體之間發(fā)生了沖突,就會對實驗結(jié)果產(chǎn)生較大影響。要避免這一問題,我們可以選擇購買“matched pair"的捕獲/檢測抗體對,這些打包在一起的抗體是商家經(jīng)過驗證才*的好組合。
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