ELISA實(shí)驗(yàn)看似簡略,其實(shí)不然。記住從前一個(gè)同學(xué)*次做ELISA實(shí)驗(yàn),跟我說,ELISA實(shí)驗(yàn)簡直太簡略了,到第2次在次做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)分,他驚奇了,說效果不同怎樣這么大(同一份標(biāo)本),第三次的時(shí)分,他抉擇仔細(xì)的做一次,搶奪做到同一份標(biāo)本,這次讓他感受到ELISA并不是那么簡略,發(fā)覺其實(shí)挺難的。今日的文章中為我們敘說一些ELISA實(shí)驗(yàn)中的小技巧,希望對我們有所協(xié)助!
1.操作前應(yīng)對實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)垂直參與標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗潔凈,避免污染,加樣次第要與說明書一起,否則可導(dǎo)致效果差錯(cuò),實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。
3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要超越說明書*的洗刷次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)逗留的時(shí)間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,構(gòu)成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。
4.要保證加液量一起ELISA試劑盒我們在運(yùn)用時(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,構(gòu)成顯色不一致,判別差錯(cuò)。
5.顯色液量不可過多加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過多,避免顯色過強(qiáng)。
ELISA試劑盒的影響要素應(yīng)選用有國家批準(zhǔn)文號,質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖廉價(jià),忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在運(yùn)用時(shí)先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜穿插運(yùn)用。試劑打開后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先查看是否蛻變,顯色劑如被污染變色將構(gòu)成悉數(shù)顯色,導(dǎo)致差錯(cuò)效果。
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