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技術文章

ELISA試劑盒浸泡式洗刷方法流程

閱讀:205發布時間:2017-1-6

ELISA試劑盒浸泡式洗刷方法流程
吸干或甩干孔內反應液;
用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去);
吸干孔內液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
浸泡,即將洗刷液注滿板孔,放置1-2 分鐘,間歇搖晃,浸泡時間不行隨意縮短;
開始用于小珠載體的洗刷,洗刷液僅為蒸餾水甚至可用自來水。
微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。
重復操作c 和d,洗刷3-4次(或按說明規則)。
在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數或延伸浸泡時間。
ELISA試劑盒聚苯乙烯載體與蛋白質的聯絡是疏水性的,非離子型洗刷劑既含疏水基團,ELISA試劑盒也含親水基團,其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵聯絡,然后削弱蛋白質與固相載體的聯絡,并借助于親水基團和水分子的聯絡效果,使蛋白質回復到水溶液情況,然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑通常是吐溫 20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低實驗的靈敏度。
洗刷時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗刷效果更佳。
洗刷時附接一格外設備,使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗,繼續沖刷 2 分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2 分鐘,吸干即可。
浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比如淋浴,其洗刷效果更為*,且也簡練、迅速。
ELISA試劑盒實驗標明,流水沖刷式一樣也適用于微量滴定板的洗刷。


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