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技術(shù)文章

ELISA試劑盒ELISA空白孔的設(shè)置

閱讀:364發(fā)布時(shí)間:2017-3-13

ELISA試劑盒ELISA空白對(duì)照有幾種:
1. 空氣空白水空白:通常是用于儀器調(diào)零的,一切孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值。
2.底物空白:通常是用于避免底物弱顯色所形成的讀數(shù)偏高,相同一切孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值(只加底物和停止液)
3. 酶空白:通常在2步法試驗(yàn)中運(yùn)用,主要是看酶是不是和板有非特異性的,通常不做這個(gè) 。 

   ELISA空白孔通常設(shè)一個(gè),這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽性規(guī)范品是設(shè)2個(gè)復(fù)孔,雖然有點(diǎn)可惜,但為了保證試驗(yàn)的可靠性,我以為仍是很有必要的。ELISA空白孔加啥?通常兩個(gè)做法,看自己習(xí)氣或者說看你們?cè)囼?yàn)室的習(xí)氣:
1.啥都不加,然后那個(gè)孔依照操作流程來做,這個(gè)說法的依據(jù)就空白,也即是啥都沒有。
2.加*,然后依照操作流程來做。這個(gè)做法的依據(jù)即是只需不含陽性物質(zhì)就算是空白的,參加*的意圖是為了使這個(gè)孔除了在沒有陽性物質(zhì)上別的的都與別的孔共同。

怎樣操控顯色時(shí)刻?
   顯色時(shí)刻要通過預(yù)試驗(yàn)找到所測(cè)一切sample的顯色OD在0.1到2.0的有用range間,我用過OPD solution,通常incubation for 15min at RT,測(cè)一次然后當(dāng)即參加stop solution 在測(cè)一次。


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