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技術文章

處理ELISA試劑盒的方發法

閱讀:319發布時間:2017-5-15

做elisa試驗樣本的處理及請求:
1.組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖刷組織,去掉殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響丈量成果),稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(通常按1:9的分量體積比,比方1g的組織樣品對應9mL的PBS,詳細體積可根據試驗需求恰當調整,并做好記錄。推薦在PBS中參加蛋白酶抑制劑)參加玻璃勻漿器中,于冰上充沛研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或重復凍融。zui終將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢查。
2.血清:將搜集于血清別離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保留,但應防止重復凍融。
3.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑收集標本,并將標本在收集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢查,或將上清置于-20℃或-80℃保留,但應防止重復凍融。
4.細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢查,或將上清置于-20℃或-80℃保留,但應防止重復凍融。
注:標本溶血會影響zui終檢查成果,因而溶血標本不宜進行此項檢查。

 


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