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公司動態

ELISA試劑盒實驗原理解析

閱讀:208發布時間:2017-10-23

ELISA試劑盒技術流程ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。結合在固相載體外表的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶符號的抗原或抗體既保存其免疫學活性,又保存酶的活性。在測守時,ELISA試劑盒受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的方法使固相載體上構成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分隔。再參加酶符號的抗原或抗體,也經過反響而結合在固相載體上。此刻固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈必定的份額。參加酶反響的底物后,底物被酶催化成為有色產品,產品的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。因為酶的催化功率很高,間接地擴大了免疫反響的成果,使測定方法到達很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。 
ELISA試劑盒組成結構:
1、 血清:操作過程中防止任何細胞影響。運用不含熱原和內毒素的試管。搜集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞敏捷小心腸別離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 安排勻漿:將安排參加適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不當即運用,應將其分紅小部分-70℃保存,防止重復冷凍。盡可能的不要運用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結。應在室溫下凍結并確保樣品均勻地充沛凍結。
ELISA試劑盒操作注意事項
1.試劑應按標簽闡明書貯存,運用前康復到室溫。稀稀往后的規范品應丟掉,不行保存。
2.試驗中不必的板條應當即放回包裝袋中,密封保存,防止蛻變。
3.不必的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前運用。
4.運用一次性的吸頭防止穿插污染,汲取停止液和底物A、B液時,防止運用帶金屬部分的加樣器。
5.運用潔凈的塑料容器裝備洗刷液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗刷酶標板時應充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
7.底物A應蒸發,防止*翻開蓋子。底物B對光敏感,防止*露出于光下。防止用手觸摸,有毒。試驗完成后應當即讀取OD值。
8.參加試劑的次序應共同,以確保一切反響板孔溫育的時刻一樣。
9.依照闡明書中標明的時刻、加液的量及次序進行溫育操作。

 


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