進(jìn)口elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的操作：
① 將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入標(biāo)準(zhǔn)樣品，制成混合標(biāo)樣，并配制一系列的已知濃度的工作標(biāo)樣。混合標(biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。
② 注入色譜柱，以（標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積）為響應(yīng)值。
③ 根據(jù)響應(yīng)值與工作標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系，即W=f×A，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。
④ 將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測(cè)組分的響應(yīng)值。
⑤ 根據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測(cè)組分的濃度。
注意事項(xiàng)
1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
進(jìn)口elisa試劑盒牛γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit    英文名：    Bovine Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
牛γ氨基丁酸(GABA)ELISA Kit    英文名：    Bovine Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit
牛β-乳球蛋白(β-LG)(過敏原Bosd5)(LGB)ELISA Kit    英文名：    Bovine beta-lactoglobulin(Beta-LG)(allergen Bosd5)(LGB)ELISA kit
牛β羥基丁酸脫氫酶(β-HBDH)ELISA Kit    英文名：    Bovine β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,β-HBDH ELISA Kit
牛β羥丁酸(βOHB)ELISA Kit    英文名：    Bovine Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA Kit
牛β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA Kit    英文名：    Bovine Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit
牛β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA Kit    英文名：    Bovine Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit
牛β-防御素(β-Defensins)ELISA Kit    英文名：    Bovine β-Defensins ELISA Kit
牛α乳清蛋白(α-La)ELISA Kit    英文名：    Bovine α Lactalbumin,α-La ELISA Kit
牛α晶體B鏈(CRYAB)ELISA Kit    英文名：    Bovine Alpha-crystallin B chain,CRYAB ELISA kit
牛α干擾素(IFN-α)ELISA Kit    英文名：    Bovine Interferon α,IFN-α ELISA Kit
牛α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit    英文名：    Bovine α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit
牛P物質(zhì)(SP)ELISA Kit    英文名：    Bovine substance P,SP ELISA kit
牛N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit    英文名：    Bovine N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit
牛N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA Kit    英文名：    Bovine N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA kit
牛D-乳酸ELISA Kit    英文名：    Bovine D-lactic acid ELISA Kit
牛C肽(C-Peptide)ELISA Kit    英文名：    Bovine C-Peptide ELISA Kit
牛C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA Kit    英文名：    Bovine C-reactive protein,CRP ELISA Kit
牛5羥色銨/血清素/血清銨(5HT/ST)ELISA Kit    英文名：    Bovine 5-hydroxytryptamine/serotonin,5HT/ST ELISA kit
牛Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)ELISA Kit    英文名：    Bovine N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA kit
牛1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶ζ1(PLCZ1)ELISA Kit    英文名：    Bovine 1-phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate phosphodiesterase zeta-1(PLCZ1)ELISA kit
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