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TSZelisa試劑盒測定注意要點(diǎn)

時(shí)間:2018/1/17閱讀:254
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TSZelisa試劑盒測定注意要點(diǎn):
1.每次添加的氫氧化鈉量對數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性至關(guān)重要,每次添加量必須準(zhǔn)確相等,且每次檢測時(shí)的空白樣及樣品添加的氫氧化鈉濃度一致;
2.每次檢測的空白對照與樣品的測定時(shí)間相差不大于2小時(shí);
3.樣品終止反應(yīng)后,反應(yīng)液在20min內(nèi)滴定,空白對照溶液在加入酶液20min內(nèi)滴定;
4.因酶液靜止放置過程中會有沉降現(xiàn)象,所以每次使用酶液前必須搖勻,保證酶液混合均勻;
5.測定時(shí)所使用的玻璃儀器要用洗滌劑清洗用蒸餾水沖洗過后并烘干再使用;
6.氧氣管口保持在液面下,保證氧氣與反應(yīng)液接觸。
操作要點(diǎn)
1.仔細(xì)閱讀說明書,確定胰島素ELISA試劑盒在有效期內(nèi)。按說明書確定所有試劑齊全,以及所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。
2.標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存。
3.按胰島素ELISA試劑盒說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。
4.選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對。若選擇兩個(gè)單抗,必須識別不同表位的抗體,從同一家公司選擇抗體。
5.一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的Elsia操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
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