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細胞培養常用的幾種試劑

時間:2021/10/12閱讀:2134
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 細胞培養也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術必須 的環節,而且細胞培養本身就是細胞的克隆。接下來來了解在培養細胞的實驗中有有幾種試劑:

(1)高糖DMEM溶液: 用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(規格10×1L),溶入約總量的1/3的三蒸水,并用水洗凈包裝袋,在磁力攪拌器上攪拌30分鐘,加入NaHCO2 3.75克,補加水至最終量。用1N HCL調整PH為7.2,0.22μm濾膜抽濾除菌,分裝-20℃保存,使用時加10%的胎牛血清及雙抗溶液(最終濃度:青霉素100U/ml,鏈霉素 100μg/ml)

(2) 胎牛血清: 使用前56℃水浴30分鐘滅活,無菌條件下分裝成10ml包裝,-20℃保存。用時以10%濃度注入培養液中。

(3) 青霉素、鏈霉素雙抗溶液 青霉素100萬單位及硫酸鏈霉素1g無菌條件下溶于消毒三蒸水10ml,分裝,-20℃保存。使用時每1000ml培養液加入青、鏈霉素混合液1ml,最終濃度為青霉素100單位/ml,鏈霉素100μg/ml。

(4)磷酸鹽溶液(PBS): NaCl 8g, KCl 0.4g, NaHPO4.H2O 1.15g KH2PO4 0.2g 分別溶于1000ml三蒸水中,調節PH值至7.4高壓蒸氣滅菌,分裝后4℃保存。

(5)胰蛋白酶溶液: 用三蒸水制備成0.25%濃度,0.22μm濾膜抽濾除菌,4℃保存。

(6)0.1%明膠溶液: 稱取明膠粉劑0.1g于燒杯中,加入三蒸水100mL于50℃充分攪拌至其*溶解,0.22μm濾膜抽濾除菌,4℃保存。


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