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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、產品僅用于科研鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產品名稱 | |
英文名稱 | Anti-MMP-14 |
貨號 | FSK7150 |
別 名 MMP-14; MMP14; Membrane-type matrix metalloproteinase 1; MT-MMP 1; MTMMP1; Membrane-type-1 matrix metalloproteinase; MT1-MMP; MT1MMP; MMP-X1; MT-MMP; MMP14_HUMAN.
英文名稱 Anti-MMP-14
中文名稱 基質金屬蛋白酶-14抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Pig, Sheep
產品類型 一抗 ?
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。?
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:產品僅用于科研抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
Strontium chloride hexahydrate二乙氨基乙 99%霉酚酸嗎啉乙酯 分析標準品,≥98%
Rubidium chlorideN-甲酰嗎啉 99%新橙皮苷 分析標準品,≥97%
Ruthenium(III) chloride4-(2-羥乙基)嗎啉 99%新芒果苷 分析標準品,≥98%
Ruodium (Ⅲ) Chloride Hydrate1-(2-羥乙基)哌啶 99%蕓香柚皮苷 分析標準品,≥98%
Cerous chlorideN-甲基嗎啉 GR,99%補骨脂素 分析標準品,≥98%
Lanthanum chloride heptahydrateN-甲基二乙胺 99%補骨脂素 98%
Neodymium(III) chlorideN-甲基嗎啉-N-氧化物 50%水溶液枸橘苷 分析標準品,≥98%
Hematinβ-巰基乙 生物技術級 苦鬼臼毒素 分析標準品,≥98%
Ethylene glycolβ-巰基乙 AR,99.0%()原薯蕷皂苷 分析標準品,≥98%
PVAβ-巰基乙 CP,95.0%(槲皮苷 分析標準品,≥98%
PVB鈦酸鋇 粉末, <2 μm, 99.5% metals basis金絲桃苷 分析標準品,≥98%
1,3-Propanediol氯化鋇,二水 CP,99%槲皮素 分析標準品,≥98.5%
1,3-Butanediol碳酸鋇 CP,98%槲皮素 97%
BDO碳酸鋇 99.95% metals basis吳茱萸次堿 分析標準品,≥98%
2,3-Butanediol碳酸鋇 99.8%,D50 0.5-1.5μm吳茱萸次堿 98%
BT碳酸鍶 電子級,0.3~0.5um,99.5%迷迭香酸 分析標準品,≥97%
基質金屬蛋白酶-14抗體去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷PathScan® Phospho-Rb (Ser780) Sandwich ELISA KitRabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗人IgG F(ab')2
醋甲唑胺TORC2/CRTC2 (5B10) Mouse mAbRabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗人IgG F(ab')2
醋甲唑胺(標準品)S100A4 (D9F9D) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人IgG F(ab')2
齊拉西酮Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗人IgG F(ab')2
塞曲司特/西拉達司/塞拉司特SARM1 (D2M5I) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE PE標記的兔抗人IgG F(ab')2
美托拉宗Phospho-CDCP1 (Tyr806) AntibodyRabbit Anti-human IgG F(ab')2/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗人IgG F(ab')2
美托拉宗(標準品)PFKFB2 (D5I5F) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG F(ab')2/Gold 膠體金標記的兔抗人IgG F(ab')2
西地尼布馬來酸鹽LKB1 (D60C5F10) Rabbit mAb (IHC Formulated)Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/FITC FITC標記的兔抗人IgG F(ab')2
西他列汀LKB1 (D60C5F10) Rabbit mAb (IHC Formulated)Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy7 Cy7標記的兔抗人IgG F(ab')2
維達列汀;維格列汀PathScan® Total M-CSF Receptor Sandwich ELISA KitRabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗人IgG F(ab')2
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