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貨號 | A-PJ1117 | 分類 | 核酸酶系列 |
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規格 | 100U、500U | 品牌 | 撫生 |
公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產品介紹:
南極熱敏UDG是來源于嗜冷海洋細菌經大腸桿菌表達純化的的重組蛋白。
該酶能有效地水解單鏈或雙鏈DNA 上的niao嘧啶,產生的缺嘧啶位點,在高溫或高 pH下,極易水解斷裂。該酶對 RNA 無活性,主要用于 PCR擴增產物的防污染。大腸桿菌來源的niao嘧啶-DNA 糖基化酶較為耐熱,經 95℃10min 處理仍會殘留有少量的niao嘧啶-DNA 糖基化酶活性,導致含有 dU 堿基的 PCR 產物的降解。
而來源于嗜冷海洋細菌的熱敏型 UDG 在 50℃5min 即失活,在進行 PCR 擴增前,在 PCR 混合液中添加niao嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性),25℃ 2min 即可消除以往 PCR 產物的殘留污染,由于niao嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性)在 PCR 循環的 94℃變性一步便可被滅活,因此不會影響新的含 dU 的 PCR 產物。
活性定義:在標準反應體系下,37°C 每分鐘催化 60 pmol niao嘧啶從含niao嘧啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為一個活性單位。
反應 Buffer:
ThermoLabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)與絕大多數的 PCR 聚合酶反應緩沖液都是兼容的,但在高離子濃度(>100 mM)下活性會受到抑制。在防污染 PCR 中的使用濃度推薦為 10 mU-50 mU/μ(l 25℃下作用 2min 即可),在不同的緩沖系統下可能會有差別。
酶儲存液:20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
儲存:置于-20°C 可保存 2 年。
熱失活:50°C,5min。
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