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貨號 | A-PJ1054 | 分類 | 其他DNA/RNA聚合酶 |
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規格 | 1000U | 品牌 | 撫生 |
公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!
產品介紹:
Klenow Fragment(exo-)
Klenow 片段(3′→5′ exo-)是 DNA 聚合酶 I 的 N末端截短物,它保留了 DNA 聚合酶活性,但失去了 5′→3′核酸外切酶活性。該酶進一步經突變(D355A,E357A)去除了其 3′→5′的核酸外切酶活性。因此該 DNA 聚合酶無任何外切酶活性,僅包含了 DNA 聚合酶活性,廣泛用于標記探針制備、cDNA 第二條鏈的合成等建庫試驗。
單位定義
一個活力單位即在 37°C 條件下,30 分鐘內催化 10 nmoldNTP 的摻入反應成為酸不溶性物質所需的酶量。該酶保存液中含有 50%甘油。
10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl (pH 8.0 at 25 °C), 50mM MgCl2, 10 mM DTT. 該酶兼容 PCR Buffer 和內切酶Buffer。
應用:
(1)用隨機引物制備探針
(2)隨機引物法標記
(3)cDNA 第二條鏈的合成
(4)該酶不能用于產物平端不齊
失活:
75°C,20min 失活。
儲存:-20℃可保存 3 年。
95°C 5min 冰上放置 5min。
2. 聚合反應
加入 0.5 μl Klenow Fragment(exo-),混合均勻。37°C 反應 15min,75°C 20min 失活。
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