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產地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 |
基本信息:
資源名稱 斯氏李斯特氏菌多少錢
種屬:Listeria seeligeri
安全等級 1
模式菌株 no
應用領域 研究、質量控制
培養方法
培養基 腦心浸液瓊脂(BHIA):
牛腦浸粉 4.0g,牛心浸粉 4.0g,蛋白胨 5.0g,酪蛋白胨16.0g,NaCl 5.0g,葡萄糖 2.0g,磷酸氫二鈉 2.5g,瓊脂 20.0g,pH7.4 ± 0.2。121℃,15min。
生長條件 37℃,好氧
低溫存法:
①斯氏李斯特氏菌多少錢簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
注意事項:
1、斯氏李斯特氏菌多少錢忌與殺菌的化學農藥一并使用,使用過的殺菌劑或者噴霧器需要*清洗后才能使用。
2、包裝開啟后請一次性用完,未用完應密封,并放置于陰涼、干燥的環境里保存。
3、貯存方法:在密封、陰涼、干燥之處保存
脫水存法:
①斯氏李斯特氏菌多少錢沙土保存法,能產孢子的細菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內,裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養基上生長良好的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經真空抽干,外觀呈松散狀態,于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。
② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管內于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽結凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。
③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。
微生物菌種的培養:
⒈斯氏李斯特氏菌多少錢孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
糜蛋白酶原Lysis Buffer,pH8.0 1瓶
梭菌蛋白酶Lysozyme Powder1瓶
膠原酶Ⅰ型Lysozyme Solution1瓶
膠原酶Ⅱ型Lysozyme, Egg White1瓶
膠原酶Ⅲ型Lywallzyme Powder1瓶
膠原酶Ⅳ型L-α-Lecithin1瓶
DNA 酶,Ⅱ型L-α-Lecithin 1瓶
心肌黃酶M-07e1瓶
彈性蛋白酶 ( 豬胰 )M11瓶
半乳糖氧化酶M13mp18 DNA1瓶
β- 半乳糖苷酶M13mp18 DNA1瓶
己糖激酶M141瓶
透明質酸M15 E.coli Strain1瓶
乳酸過氧化物酶M50761瓶
胃粘膜素M-6191瓶
* Pseudomonas Selective Agar 1.07620.500MERCK默克
* R2A agar R2A瓊脂 1.00416.0500MERCK默克
* IST Rambach agar Rambach瓊脂 1.07500.0001MERCK默克
* Rogosa agar Lactobacillus selective agar Rogosa瓊脂/乳酸菌選擇瓊脂 1.05413.0500MERCK默克
* Ropse-Bengal Chloramphenicol Agar羅斯-孟加拉氯霉素瓊脂 1.00467.0500MERCK默克
* SABOURUD 2% dextrose agar沙氏 2%右旋糖瓊脂 1.07315.0500MERCK默克
斯氏李斯特氏菌多少錢伊紅美藍瓊脂(EMB) 250(g)
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(TSSB) 250(g)
腸球菌肉湯 250(g)
胰化大豆-堅牢綠瓊脂(TSFA) 250(g)
半固體營養瓊脂 250(g)
氯蔗糖瓊脂 250(g)
綠膿菌素測定培養基 250(g)
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