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牛流行熱病毒(BEFV)熒光PCR法

參  考  價:2990
具體成交價以合同協議為準
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    上海市

規格

50T 2990元 15盒可售

更新時間:2023-10-31 15:50:42瀏覽次數:147次

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產地 國產 加工定制
規格 50T 貨號 AP3744
檢測范圍 2×103~1×108copies/mL 用途 僅供科研實驗
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脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒
脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)ELISA試劑盒

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

牛流行熱病毒(BEFV)熒光PCR法優點:①靈敏度高、特異性強。

②時間短,2-3小時出結果。

③檢測結果可定量。

④操作簡便。

缺點:①對于已做支原體滅活處理的樣品,由于支原體DNA仍舊存在其中,PCR結果會出現假陽性。(可用培養法做補充驗證)

②不同廠家生產的試劑盒質量差異巨大(由于引物及內在設計不同),需謹慎選擇,盡量在業人員推薦指導下使用。

【質量控制】

              1.陰性對照:Ct 值>38 或未檢出。

              2.陽性對照:擴增曲線呈 S 型,且 Ct 值≤30。

              3.同一實驗以上要求需同時滿足,否則本次實驗視為無效。

              4.每種檢測靶標都需設陰陽對照,不同的靶標根據對應陰性調整基線閾值。

【結果判讀】

              1.FAM 通道檢測 B 組鏈球菌。

              2.陰性:Ct 值>38 或未檢出。

              3.陽性:擴增曲線呈 S 型,且 Ct 值≤35。

              4.可疑:擴增曲線呈 S 型,且 35<Ct 值≤38,需復檢;復檢結果若一致,判定結果為陽性。

【檢驗方法的局限性】

              1.樣品采集、運輸、保存不當,試劑運輸、保存、配置不當都可能會影響實驗結果,甚至會導致假陰性結果。

              2.如果實驗室污染、試劑污染、樣品交叉污染,可能出現假陽性結果。

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