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人尿激酶U)免疫組化試劑盒操作步驟
1.取出試
室溫(20-25℃)放置30分鐘
2.分組:取出96孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品
6個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組
注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)
加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入100u的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入100u的蔡餾水;其余微孔中加入100u
的待測(cè)樣本
加酧標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50u的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)
溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時(shí)。
6.洗板:用稀釋后的洗滌液注滿毎孔,靜置15-30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干。
7.顯色:各孔加入顯色劑A液50u后,再加入顯色劑B液50ul
8.終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液
9.讀板:在450nm波長(zhǎng)讀取各孔的OD值
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