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多功能氧化酶(MFO)微量法檢測試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-24 16:21:38瀏覽次數:161次

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貨號 GOY-01S6474
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商品屬性:

產品名稱

多功能氧化酶(MFO)微量法檢測試劑盒

規格

100管/96樣

檢測方法

微量法

貨號

GOY-01S6474

商品介紹:

測定意義

多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產生降解反應,可使原化學物質變為低毒的或無毒的物質從體內排出;還可產生激活反應,可使原化學物質轉化為具有親電子性質,導致毒性增強,成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學物質相互作用的深入研究,對于從分子生物學水平上進一步了解外源性化學物質的毒作用具有重要意義。

測定原理:

MFO催化對硝基苯甲醚產生對硝基,在405nm下有特征吸光值。

自備用品:

分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

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多功能氧化酶(MFO)微量法檢測試劑盒硒粉 ≥99.999% metals basis,-100mesh,powderDNA修復蛋白Rad23抗體

≥99.9999% metals basis,Powder組織相容性復合物RTF1抗體

水質硒標樣 濃度范圍:4.95-20.2(mg/L),分析標準品核糖核苷還原1抗體

99.999% metals basis,1-6MM particle size 環指蛋白167抗體

≥99.9999% metals basis,Powder,不規則顆粒抵抗素抗體

Standard for GC,>99.9(GC)Ras特異性核苷釋放因子1

光譜級, ≥99.5%核糖體S6激RSK2抗體

(THF) 無水級,≥99.9%, 無穩定劑受體激活蛋白激C1抗體

AR,99.0%孤兒核受體抗體

 ≥99.5% (GC)環指蛋白17抗體

for HPLC, ≥99.9%呼吸道合胞病抗體

ACS,>99.5% (GC) 周期檢查控制蛋白質抗體

溴乙烷 AR,98%化周期檢查控制蛋白質抗體

N,O-雙(硅烷)三氟 96%化周期檢查控制蛋白質抗體

2-溴噻吩 98%化周期檢查控制蛋白質抗體

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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