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兔骨內膜間充質干細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 11:55:37瀏覽次數:195次

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原代細胞
貨號 GOY-01X0744
兔骨內膜間充質干細胞公司正在出售的產品:3%NaCl乳糖 20支2 ug pCDFDuet-1 pCDFDuet-1 低溫運輸,-20℃保存MS培養基(不含有機元素,不含瓊脂和蔗糖) 250g1g 硫酸卡那 Kanamycin Sulfate 室溫保存50T 輪狀病毒A組PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

兔骨內膜間充質干細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0744

商品介紹:

名稱 兔骨內膜間充質干細胞

2.組織來源:股骨、脛骨

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

兔骨內膜間充質干細胞分離自股骨、脛骨;骨內膜是一層致密結締組織膜,覆蓋在骨的表面(關節面除外),新鮮骨內膜呈粉紅色,含有豐富的血管、神經和成骨細胞。此外,附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內膜編織在一起。因而骨內膜與骨質結合甚為牢固。骨內膜富含血管、神經,通過骨質的滋養孔分布于骨質和骨髓。骨內膜分內、外兩層,外層主要是粗大的膠原纖維束,部分纖維穿入骨質,使骨內膜固定于骨面;內層疏松,含成骨細胞和破骨細胞(分別具有產生新骨質和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松質的網眼也襯著一層菲薄的結締組織膜,叫做骨膜。骨內膜的內層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力,以形成新骨質和破壞、改造已生成的骨質,所以對骨的發生、生長、修復等具有重要意義。骨內膜間充質干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。骨內膜間充質干細胞的體外培養條件要求較高,在培養過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。

5.方法簡介:

()實驗室分離的兔骨內膜間充質干細胞采用沖洗骨髓、消化骨內膜、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的兔骨內膜間充質干細胞CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-Rb014

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%;CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

人類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 / Capsid Protein p24 ELISA配對抗體

TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A ELISA配對抗體

Endoglin / CD105 / ENG ELISA配對抗體

IL1R2 / IL1RB / CD121b ELISA配對抗體

IL17RA / CD217 ELISA配對抗體

Apolipoprotein H / APOH ELISA配對抗體

CD40 / TNFRSF5 ELISA配對抗體

CD36

兔骨內膜間充質干細胞2 ug pCDH-EF1-copGFP pCDH-EF1-copGFP 低溫運輸,-20℃保存

250M Storage Buffer in TBS and Glycerol  Storage Buffer in TBS and Glycerol  常溫保存

250mL MES Buffer,1.0M,pH9.0   MES Buffer,1.0M,pH9.0   常溫保存

1瓶 TALL-104細胞株 TALL-104 低溫運輸和保存

50T 豬圓環病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

5次 Southern級動物DNAout Southern Grade Animal DNAOUT 4℃保存,蛋白K需要低溫運輸,-20℃保存

CREB-H/CREB3L3  環苷酸應答元件結合蛋白H抗體 規格: 0.2ml

CCL6/C10  嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL6抗體 規格: 0.2ml

TNIK  TRAF2和NCK激相互作用蛋白抗體 規格: 0.2ml

SPAG8  子相關抗原8抗體 規格: 0.2ml

COL6A5/Collagen VI alpha 5  6型膠原蛋白α5抗體 規格: 0.2ml

Laminin alpha 1  層粘蛋白α1抗體 規格: 0.1ml

 

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