參數規格：
產品名稱：賈第蟲通用LAMP試劑盒
英文名稱：Universal lamp kit for Giardia
貨號：GOY-L64065
產品規格：50次
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

【友情提示】：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！

商品介紹

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1，建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用（10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；

（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間 30min可以延長到 40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測，通常可以使測定正常。

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測定步驟：

1、 酶標儀預熱30min以上，調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測定樣本較少，可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內用完）。

5、 樣本測定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
細胞樣品細白表達流式細胞儀檢測試劑盒　HIST1H1T ELISA Kit　20 ul

載玻片細胞樣品細白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒　HMBOX1 ELISA Kit　100 ul

載玻片細胞樣品細表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒　HIST1H2AC ELISA Kit　100 ul

冰凍切片組織細表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒　HS3ST1 ELISA Kit　100 ul

石蠟切片組織細白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒　HS1BP3 ELISA Kit　100 ul

細胞樣品細胞蛋白表達比色法定量檢測試劑盒　HS2ST1 ELISA Kit　100 ul

細胞樣品細胞蛋白表達熒光定量檢測試劑盒　HSBP1 ELISA Kit　20 ul

蛋白表達西方雜交分析試劑盒　HSD11B2 ELISA Kit　100 ul

蛋白免疫共沉淀分析試劑盒　HSCB ELISA Kit　100 ul

蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒　HSD17B2 ELISA Kit　300 ul

性染色體分離（Ericsson法）試劑盒　HSD17B4 ELISA Kit　100 ul

性染色體分離（percoll法）試劑盒　HSD17B6 ELISA Kit　20 ul

性染色體分離（流式儀法）試劑盒　HIST2H2AA4 ELISA Kit　100 ul

細胞氧化應激活性氧（ROS）細胞流式儀檢測試劑盒　HMCN1 ELISA Kit　100 ul

細胞氧化應激活性氧超氧陰離子細胞流式儀檢測試劑盒　Histone-H3 ELISA Kit　300 ul

細胞BWW培養液　HIST3H2A ELISA Kit　400 ul
賈第蟲通用LAMP試劑盒多肽N-酰氨基半糖轉移酶10MIP-3 Alpha  巨噬細胞炎性蛋白-3α100 ul

多肽N-酰氨基半糖轉移酶11MIP-3 Beta  巨噬細胞炎性蛋白-3β300 ul

多肽N-酰氨基半糖轉移酶12MIP-4  巨噬細胞炎性蛋白-4100 ul

多肽N-酰氨基半糖轉移酶1MIP-5  巨噬細胞炎性蛋白-520 ul

晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內障相關蛋白MCP-1  巨噬細胞趨化蛋白-1100µg

γ-微管蛋白復合物GCP3mouse MMP-9  血清金屬基質蛋白酶-9100 ul

胍基酸N甲基轉移酶RANS  趨化因子100 ul

α-葡萄糖苷酶CG-CSF  粒細胞-集落刺激因子100 ul

生長激素釋放因子受體GM-CSF  粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子100 ul
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
   10×PCR buffer             5μl
     dNTP mixl                 4μl
     引物1（10pM）               2μl
     引物2（10PM）              2μ
     Taq酶（2U/μl）            1μl
     DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
  視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。