實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產品屬性：

產品介紹：

名稱    大鼠前列腺干細胞

2.組織來源：前列腺

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

大鼠前列腺干細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性*的性腺器官；前列腺是不成對的實質性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為內分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠前列腺干細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過前列腺干細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的大鼠前列腺干細胞經Sca-1免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-R178

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態長梭形

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

100mL DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0  DIPSO Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

10mL 超級雜交液（原位雜交） SuperHyb Solution for ISH -20℃保存

2 ug pIK pIK 低溫運輸，-20℃保存

尿素卵黃雙糖培養基 Urea- Egg Yolk double sugar Medium 250g

1瓶 L Wnt-3A細胞株 L Wnt-3A 低溫運輸和保存

苯脫氨 Phenylalanine Deaminase Medium 1m?嵌?L?

大鼠前列腺干細胞DAG1  肌萎相關蛋白DAG1抗體 規格: 0.1ml

Lefty/TGF beta 4  轉化生因子β4抗體TGF β4 規格: 0.2ml

phospho-KCND2/Kv4.2(Thr607)  磷酸化電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2抗體 規格: 0.1ml

Bcl-10/CLAP/CIPER  Bcl-10抗體 規格: 0.1mlAFF4  淋巴細胞相關AF4樣蛋白抗體 規格: 0.2ml

Goat Anti-rat IgG/Cy3  Cy3標記的羊抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/RBITC  羅丹明標記的兔抗大鼠IgG 規格: 0.3ml

phospho-SYN1(Ser549)  磷酸化神經突觸素1抗體 0.1ml

ALS2CR4  肌萎側索硬化癥相關蛋白4抗體 規格: 0.2ml

phospho-IRS-1(Ser307)  磷酸化胰島素受體底物p-IRS-1/2抗體 規格: 0.1ml

Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D  ras基因家族Rab3A--Rab3D抗體 規格: 0.2mlMitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1  丙酮酸脫激1抗體 規格: 0.1ml

CCL12/MCP5  單核細胞趨化蛋白5抗體 規格: 0.2mlWNK3 protein  /激家族成員的基因WNK3抗體 規格: 0.1ml

GTPBP9  核苷酸結合蛋白9抗體 規格: 0.2ml