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多酚氧化酶(PPO)可見分光光度法檢測試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-24 15:11:36瀏覽次數:225次

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貨號 GOY-01S6420
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商品屬性:

產品名稱

多酚氧化酶(PPO)可見分光光度法檢測試劑盒

規格

50管/24樣

檢測方法

可見分光光度法

貨號

GOY-01S6420

商品介紹:

測定意義

PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質和組培等密切相關。

測定原理:

PPO能夠催化鄰苯二酚產生醌,后者在525nm有特征光吸收。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

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多酚氧化酶(PPO)可見分光光度法檢測試劑盒 98%大鼠狀旁(PTH)免疫試劑盒神經生長相關蛋白43hnRNP F  異質核糖核蛋白F抗體

2-氨-5-硝-6-吡  98%大鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)免疫試劑盒3-甘油脫氫(兔來源免疫組化用抗體)hnRNP A2B1  異質核糖核蛋白hnRNPA2抗體

2-氨-3-硝-6-吡  98%大鼠羥戊5-焦脫羧(MDD)免疫試劑盒3-甘油脫氫單克隆抗體(內參抗體)HNF4/TCF4/HNF4A  肝核因子4α抗體

2-溴-4-氨吡 97%大鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒生長停滯特異性蛋白2家族1抗體HNF1/TCF1/HNF1A  肝核因子1α抗體

5-氨-2-吡 98%大鼠激肽原(KNG)免疫試劑盒G蛋白偶聯受體97抗體HN1L  雄激素調節樣蛋白抗體

4-氨-2-吡 98%大鼠激動異構/分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒G蛋白結合蛋白7抗體HN1/ARM2  雄激素調節蛋白2抗體

3-氨-2-吡 97%大鼠質衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒綠色熒光蛋白抗體HN protein  雞新城疫血凝素-神經氨抗體

3,5-雙(三氟) 97%大鼠質衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒綠色熒光蛋白抗體HMW Kininogen  高分子量激肽原重鏈抗體

2-溴-5-三氟 98%大鼠質金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒G蛋白通路抑制蛋白1抗體HMGCS2  三羥輔A合成2抗體

對二三氟 99%大鼠質金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒膠質系源性神經營養因子受體α2抗體HMGCS1  三羥輔A合成1

5-溴-1-茚酮 98%大鼠質金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒核突觸蛋白-γ抗體HMGCR  三羥輔A還原抗體

N-芐哌酮 98%大鼠質金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒粒-巨噬克隆激因子抗體HMGCL  三羥輔A裂解抗體

 98%大鼠質金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8/Collagenase II)免疫試劑盒還原抗體HMGB4  高遷移率族蛋白B4抗體

2--4-硝吡 98.0%大鼠質金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒胰高血糖素樣肽-1抗體HMGB1  高遷移率族蛋白B1抗體

L-蘋果二酯 98%大鼠質金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒顆粒蛋白前體抗體HMGA2  高遷移率族蛋白A2抗體

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。


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