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實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數。
公司采用的全是進口原材料研,發靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
產品名稱 | 大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat inositol 1,4,5,-trisphosphate,IP3 ELISA kit |
貨號 | GOY-R74671 |
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養上清:適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450 nm處測吸光值。
Nesprin 3蛋白(Nesp3)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 黃桿菌 1g
滑行蛋白γ(TXLNγ)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 釀酒酵母 5g
POLQ樣蛋白解旋酶(HELQ)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 鴨疫里氏桿菌 1g
原鈣黏素24(PCDH24)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 異常漢遜酵母異常變種 25g
Talanin蛋白(TALN)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 擲孢酵母 5g
Twist鄰位子(TWISTNB)(酶聯免疫吸附試驗法) >98.0%(GC) 卷柄根霉 1g
APEX核酸酶2(APEX2)(酶聯免疫吸附試驗法) >98.0%(GC) 枯草芽孢桿菌 5g
二氫二醇脫氫酶(DHDH)(酶聯免疫吸附試驗法) 96% 腫痂鏈霉菌 25g
唾液酸轉移酶8E(SIAT8E)(酶聯免疫吸附試驗法) 96% 奧氏蜜環菌 5g
Ropporin 1蛋白(ROPN1)(酶聯免疫吸附試驗法) 95% 克雷伯氏菌 1g
Gremlin 2蛋白(GREM2)(酶聯免疫吸附試驗法) 95% 黑曲霉 250mg
封閉蛋白23(CLDN23)(酶聯免疫吸附試驗法) 95% 空腸彎曲桿菌 1g
Axotrophin蛋白(AXOT)(酶聯免疫吸附試驗法) 95% 草鏈霉菌 5g
54kDa核孔蛋白(NUP54)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 粉褐粉孢牛肝菌* 25g
Osterix蛋白(OSX)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 空泡極單胞菌 5g
核糖核酸外切酶3(ERI3)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 釀酒酵母 1g
RAB11家族相互作用蛋白3(RAB11FIP3)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 中慢生華癸根瘤菌 5g
磷脂酶D3(PLD3)(酶聯免疫吸附試驗法) ≥98% 植物乳桿菌 10MG
大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa試劑盒磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體1,6-O,O-Diacetylbritannilactone中文名:1,6-二-O-乙酰基大花旋覆花內酯別名:1,6-Di-O-acetylbritannilactone; OODABL分子式:C19H26O6
磷酸化白介素1受體1抗體Ustusolate E中文名:別名:分子式:C21H26O6
白介素3抗體(人)8-Epixanthatin中文名:8-表蒼耳亭別名:分子式:C15H18O3
干擾素epsilon 1蛋白抗體Orobanchyl acetate中文名:列當醇乙酸酯別名:分子式:C21H24O7
白介素6抗體(N端)Dibritannilactone B中文名:別名:分子式:C34H46O9
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發生加樣上的差錯。
2)依據待測樣品數量加上規范品的數量決議所需的板條數。每個規范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
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