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微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
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產品名稱 | 用途 | 貨號 |
擬囊體側耳、(鮑魚菇) | 僅供科研 | GOY-01J7021
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菌種的培養:
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業發酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續挑取少許,接入瓊脂斜面培養基上,在25℃(或較高溫度)下培養5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養基)。
5、將培養成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養基上,于25~28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
1號染色體開放閱讀框174抗體Human PKC(Protein Kinase C) ELISA Kit人巨噬集落激因子(M-CSF)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框177抗體Human PKCβ1(Protein Kinase C Beta 1) ELISA Kit人轉移因子(TF)ELISA試劑盒, TF ELISA kit
1號染色體開放閱讀框180抗體Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit人抗鈣調素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒,CAM-ab ELISA kit
1號染色體開放閱讀框182抗體Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit人堿性(ALP)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框183抗體Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit人低分子質量蛋白7/β型蛋白體9(LMP7/PSMB9)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框187抗體Human PDCD1LG1(Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1) ELISA Kit人血管內皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框189抗體Human PCPE1(Procollagen C Proteinase Enhancer 1) ELISA Kit人α2纖溶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框190抗體Human PDCN(Podocin) ELISA Kit人補體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒,
擬囊體側耳、(鮑魚菇)1,2-環己烷二二縮水甘油酯 90%VEGF-R1 人血管內皮生長因子受體1猴泛素特異性肽8 (USP8)聯免疫吸附測定試劑盒
三縮水甘油對氨酚 90%VEGF-R2 人血管內皮生長因子受體2猴纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)聯免疫吸附測定試劑盒
9,10-二氫-9-氧雜-10-雜菲-10-氧化物 97%UPAR 人尿激樣纖溶原活化物受體猴低密度脂蛋白受體(LDLR)聯免疫吸附測定試劑盒
3-乙-3-氧雜丁環 96%TH1/TH2 人內因子猴內質網核信號1(ERN1)聯免疫吸附測定試劑盒
3,4-環氧環己-3,4-環氧環己酯 HLA-G 人類白抗原G猴腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL/TNFSF10)聯免疫吸附測定試劑盒
3,5-二庚酮 98%CTGF 人結締組織生長因子猴內皮素受體A(ETRA)聯免疫吸附測定試劑盒
N,N,N,N,-四環氧-4,4-二氨二 NPY(humen) 人神經肽Y猴接觸蛋白2(CNTN2)聯免疫吸附測定試劑盒
4-乙烯環氧環己烷 98%Ghrelin(Human) 人腦腸肽猴抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)聯免疫吸附測定試劑盒
溴化銫 99.5%Galectin-3(human) 人半糖凝集素-3猴單核趨化蛋白1(MCP-1)聯免疫吸附測定試劑盒
溴化銫 99.9% metals basisMIP-1 Alpha 人巨噬炎性蛋白-1α猴胃泌素釋放肽前體(ProGRP)聯免疫吸附測定試劑盒
硝銫 99.99%MIP-1 Gamma 人巨噬炎性蛋白-1γ猴10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP-10/CXCL10)聯免疫吸附測定試劑盒
硫銫 AR,99.5%MIP-1 Beta 人巨噬炎性蛋白-1β猴核孔蛋白160kda(NUP160)聯免疫吸附測定試劑盒
硫銫 99.9%MIP-2 人巨噬炎性蛋白-2猴白介素1受體II(IL-1R2)聯免疫吸附測定試劑盒
碳銫 99.99% metals basisMIP-3 Alpha 人巨噬炎性蛋白-3α猴橋粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)聯免疫吸附測定試劑盒
碳銫 AR,99% metals basisMIP-3 Beta 人巨噬炎性蛋白-3β猴雄激素受體(AR)聯免疫吸附測定試劑盒
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