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行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> 水土中亞硝酸鹽含量可見分光光度法
貨號(hào) | GOY-01S6491 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
50管/48樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6491 |
商品介紹
測(cè)定意義 亞硝酸鹽廣泛存在于水體和土壤中,不僅是有機(jī)氮分解的重要中間產(chǎn)物,也可能來自污染。人體攝入過量后,可誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。 測(cè)定原理: 在酸性條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)生成重氮化合物,再與N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物,在540nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。
Terribacillus saccharophilus硫化氫檢測(cè)試劑盒
Tessaracoccus lubricantis抗肽LL-37檢測(cè)試劑盒
Tessaracoccus oleiagri血管緊張素II檢測(cè)試劑盒
Tessaracoccus oleiagri過氧化物檢測(cè)試劑盒
Tetrasphaera australiensis支原體檢測(cè)試劑盒
Tetrasphaera duodecadis泰澤病原體檢測(cè)試劑盒
Tetrasphaera elongata弓形蟲檢測(cè)試劑盒
Tetrasphaera japonica呼腸弧病3檢測(cè)試劑盒
水土中亞硝酸鹽含量可見分光光度法檢測(cè)試劑盒p, p’-DDD標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:石油Anti-sVEGFR2/sFLK-1/FITC 熒光素標(biāo)記可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體(人)IgG豬谷氨脫氫(GDH/GLDH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
p, p’-DDD標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=7%,溶劑:石油Anti-p-VEGFR2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體IgG豬黏膜地址素黏附分子(MAdCAM1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
o,p’-DDT標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=2%Anti-FLT-3/CD135/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠FMS樣酪氨激3IgG豬信號(hào)素7A(SEMA7A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
o,p’-DDT標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=4%Anti-Phospho-FLT3 (Tyr591) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化FMS樣酪氨激3IgG豬內(nèi)皮素受體B(ETRB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2.4-D丁酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Anti-Phospho-FLT3 (Tyr589/591) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化FMS樣酪氨激3抗體IgG豬白介素11(IL-11)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2.4-D丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%Anti-Phospho-FLT3 (Tyr842) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化FMS樣酪氨激3抗體IgG豬B淋巴激活抗原B7-2(LAB7-2/CD86)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2.5-D丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=6%,溶劑:正己烷Anti-Phospho-FLT3 (Tyr969) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化FMS樣酪氨激3抗體IgG豬心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,4-滴異辛酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-VEGFR-3/FLt-4 /FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3IgG豬生存素(Surv)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
順式戊菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Anti-VEGFR-3/FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3抗體IgG豬泛素結(jié)合E2C(UBE2C)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Anti-HSP-70/RBITC 羅丹明標(biāo)記熱休克蛋白-70抗體IgG豬甘露糖受體C2 (MRC2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
阿維菌素鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品,90.5%Anti-VHL/FITC 熒光素標(biāo)記一種腫瘤抑制因子抗體IgG豬Ⅸ(F9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
乙蒜素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Anti-Vimentin/FITC 熒光素標(biāo)記波形蛋白抗體IgG豬信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
磺隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品,95%Anti-Vimentin/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記波形蛋白抗體IgG豬絲裂原激活蛋白激(MAPK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
線 分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%Anti-VIP/FITC 熒光素標(biāo)記血管活性腸肽抗體蛋白抗體IgG豬端粒相關(guān)蛋白1(TEP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=3%,溶劑:酮Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC 熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/腹脂素/內(nèi)肥素 抗體IgG豬八聚體轉(zhuǎn)錄因子2B(OTF2B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
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