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兔乳腺上皮細胞

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產品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 13:11:32瀏覽次數:198次

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科研細胞
原代細胞
貨號 GOY-01X0786
兔乳腺上皮細胞公司正在出售的產品:瓊脂培養基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂) Agar Medium F(Violet Red Bile Glucose Agar) 250g10g N ,N- 雙 (2- ) Bicine 室溫干燥保存500mL Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.0 Tris-HCl Buffer,2.0M,pH7.0 常溫保存10mL 細菌蛋白抑制劑 Prote

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

兔乳腺上皮細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0786

商品介紹:

名稱 兔乳腺上皮細胞

2.組織來源:乳腺組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

兔乳腺上皮細胞分離自乳腺組織;乳腺是復管泡狀皮膚腺,主要由腺上皮細胞組成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,導管末梢發育成腺泡;近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發生都與乳腺上皮細胞(MEC)有密切聯系,體外分離培養MECs即成為研究開展的關鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導管和腺泡組成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發育是由體內激素和局部合成的生長因子共同調控,其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化、凋亡產生極大的影響。乳腺上皮細胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織,為貼壁生長型細胞,呈多角形、圓形以及短梭形;乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能。

5.方法簡介:

()實驗室分離的兔乳腺上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的兔乳腺上皮細胞Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-Rb025

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

1瓶 A2780/Taxol細胞株 A2780/Taxol 低溫運輸和保存 15.6-1000 pg/mL 人腫瘤壞死因子配體超家族成員4(TNFSF4)ELISA試劑盒

1個 15mLDNA超濾離心管(90-150KD)   15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Fatty acid desaturase 2

500次 總抗氧化能力檢測試劑盒(ABTS法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存 3.12-200 ng/mL 人半乳糖凝集

兔乳腺上皮細胞phospho-Pyk2/PTK2B(Tyr402)  磷酸化富含的激2抗體 規格: 0.1ml

FRMD8  FRMD8蛋白抗體 規格: 0.2mlPhospho-PTEN(Ser380)  磷酸化瘤抑制基因PTEN抗體 規格: 0.1ml

Cullin 4A  Cullin 4a蛋白抗體 規格: 0.1ml

CSNK1G2  酪蛋白激1γ2抗體 規格: 0.2ml

PJA2/RNF131  環指蛋白131抗體 規格: 0.2ml

MKK7/ERK7  絲裂原活化蛋白激MKK7抗體 規格: 0.1ml

2 ug pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA_control (2041 ng) pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA_control (2041 ng) 低溫運輸,-20℃保存

Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗猴IgG 規格: 0.1mlEXPB-2  植物延展素-β 規格: 1ml

SPON2/M spondin/Mindin  細胞外基質底物反應蛋白2抗體 規格: 0.2mlPARL  骨骼肌細胞線粒體膜蛋白PARL抗體 規格: 0.2ml

25g 葡聚糖凝膠 LH-20 Sephadex LH-20  室溫保存

250mL Sodium Bicarbonate Buffer(鈉緩沖液),1M,pH8.5   Sodium Bicarbonate Buffer,1M,pH8.5   常溫保存

10次 一站式RNA電泳套裝 One-Stop RNA Electrophoresis Kit 4℃保存

 


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