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微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
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產品名稱 | 用途 | 貨號 |
Marivitahallyeonensis | 僅供科研 | GOY-01J6390
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菌種的培養:
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業發酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續挑取少許,接入瓊脂斜面培養基上,在25℃(或較高溫度)下培養5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養基)。
5、將培養成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養基上,于25~28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
四丁基化銨 離子對色譜級D-(+)-3-苯基乳酸 98%TPO 大鼠血小板生成素
四丁基化銨 用于電化學分析, ≥99.0%(S)-(+)-1-苯基-1,2-乙二對甲苯磺酸酯 98%EPO 大鼠促紅生成素
鞣花酸 96%DL(±)-3--3-苯基酸 98%CNTF 大鼠睫狀神經營養因子
V 分析標準品Z-L-苯 98%CTLA-4 大鼠T相關抗原4
木托盤
(S)-(-)-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉甲 98%Cytochrome-C 大鼠色素C
防半面具(硅膠) ST-PDGN-對甲苯磺酰甘 98%Emap-2 大鼠內皮單核活化多肽2
ST-FDG三號濾盒O-(四氫-2-基)羥 98%TSLP(Ret) 大鼠胸腺基質生成素
三氯化銻 AR,99%(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸 97%KGF 大鼠角蛋白生長因子
Marivitahallyeonensis4- 97%Anti-UCP-2 線粒體脫偶連蛋白2抗體小鼠血小板衍生生長因子亞B(PDGFB)聯免疫吸附測定試劑盒
4-酚 98%Anti-UCP-3 線粒體脫偶連蛋白3抗體小鼠血小板因子3(PF3)聯免疫吸附測定試劑盒
4-乙 97%Anti-Uteroglobin 珠蛋白抗體小鼠血小板因子4(PF4/CXCL4)聯免疫吸附測定試劑盒
對 98%Anti-ULBP1/N2DL1 UL16結合蛋白1蛋白抗體小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GPⅡbⅢa/CD41+CD61)聯免疫吸附測定試劑盒
2,4,6-三 98%Anti-ULBP2/N2DL2 UL16結合蛋白2抗體小鼠血小板/內皮粘附分子(PECAM1)聯免疫吸附測定試劑盒
(氧)三化 98%Anti-ULBP3/N2DL3 UL16結合蛋白3抗體小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)聯免疫吸附測定試劑盒
4-氧乙炔 99%Anti-USF-1 等上游激因子1抗體小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)聯免疫吸附測定試劑盒
4-正戊環己酮 98%Anti-VPS18 空泡分選蛋白18抗體小鼠血小板白C激底物同源性樣域家族A成員2(PHLDA2)聯免疫吸附測定試劑盒
4-正-丁-4-聯 98%Anti-Ubiquitin/UBC/UBB 泛素蛋白抗體小鼠多效生長因子(PTN)聯免疫吸附測定試劑盒
4-正戊氧乙酰 99%Anti-USP1 泛素特異性蛋白1抗體小鼠足標記蛋白(PCX)聯免疫吸附測定試劑盒
4-正乙炔 98%Anti-VAMP-1/Synaptobrevin-1 VAMP1囊泡相關膜蛋白1抗體小鼠脊髓灰質炎病受體相關蛋白1(PVRL1)聯免疫吸附測定試劑盒
4-正戊 97%Anti-VAMP-2 囊泡相關膜蛋白2抗體小鼠脊髓灰質炎病受體相關蛋白2(PVRL2)聯免疫吸附測定試劑盒
1-溴-4-戊 97%Anti-VAMP-3 囊泡相關膜蛋白3抗體小鼠脊髓灰質炎病受體相關蛋白3(PVRL3)聯免疫吸附測定試劑盒
4-聯 98%Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體小鼠活化RNA聚合轉錄輔助因子(PC4)聯免疫吸附測定試劑盒
4-正戊聯 99%anti-VASH1 血管抑制蛋白1抗體小鼠前白蛋白(PA)聯免疫吸附測定試劑盒
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