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保存方法:
傳代保存法:培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產品名稱 | 用途 | 貨號 |
特異青霉 | 僅供科研 | GOY-01J6948 |
菌種的培養:
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業發酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續挑取少許,接入瓊脂斜面培養基上,在25℃(或較高溫度)下培養5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養基)。
5、將培養成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養基上,于25~28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
吡 光譜級, ≥99.5% (GC)三氯叔丁 藥用級Anti-Integrin AlphaE2/CD103 /FITC 熒光素標記整合素αE2抗體IgG
酸酯 Standard for GC,≥99.5%(GC)三氯叔丁 98%anti-Integrin alpha E2 /FITC 熒光素標記整合素alpha E2 抗體IgG
4-(2-吡偶氮) AR三氯叔丁 分析標準品Anti-Integrin AlphaM/CD11b /FITC 熒光素標記巨噬表面分子/整合素-α2抗體IgG
4-(2-吡偶氮)98%無水檸檬酸 AR, ≥99.5% (T)Anti-Integrin avb3/FITC 熒光素標記整合素avb3抗體IgG
氫二,三水 SP USP級Anti-Integrin AlphaV Beta5/FITC 熒光素標記整合素αVβ5抗體IgG
Standard for GC CPAnti-Integrin Beta5/FITC 熒光素標記整合素β5抗體IgG
Standard for GC, ≥99.5% (GC)玉米油 試劑級Anti-IQGAP1/FITC 熒光素標記支架蛋白抗體IgG
酸正戊酯 Standard for GC玉米油 藥用級Anti-Phospho-IRAK1 (Ser376) /FITC 熒光素標記化白介素-1受體相關激1抗體IgG
特異青霉2,4-二氧乙鈉 for plant cell culture,≥98.0% (GC)絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白1抗體COX5A 色素c氧化5A抗體
高哌 98%MPP2蛋白抗體COX4NB COX4NB蛋白抗體
氧乙 98%發育相關蛋白抗體COX4/COX IV-1 色素c氧化IV亞型1抗體
氧乙鈉 98%MS4A15蛋白抗體COX3 色素C氧化亞3抗體
2,4,6-三酚 98%四度跨膜蛋白3抗體COX10 色素c氧化10抗體
乙酰酮釩 97%黑色素瘤相關抗原12抗體COX1/MTCO1 色素c氧化1抗體
乙酰酮 95%黑色素瘤相關抗原2抗體COX 5B 色素C氧化蛋白5B抗體
羥脲 98%黑色素瘤相關抗原5抗體Cortactin 皮層肌動蛋白抗體
尿嘧 99%同源盒因Msx2抗體Coronin 3 冠蛋白3抗體
尿嘧 99.5%,用于培養化雙微體2癌因抗體Coronin 1a 肌動蛋白結合蛋白CORO1A抗體
膽固 AR,>95.0%(GC)化雙微體2癌因抗體Corin 心臟特異性絲氨蛋白抗體
膽固 >97.0%(GC)三聚單克隆抗體COPS8 信號轉導蛋白亞8抗體
2-羥并咪唑 97%黑色素瘤相關抗原B1抗體COPS7A 信號轉導蛋白亞7A抗體
3,9-二(1, 1-二-2-羥乙)-2,4,8,10-氧代螺旋[5.5]十一烷 微小染色體維持缺陷蛋白5抗體COPS6 信號轉導蛋白亞6抗體
(±)-3-羥-r-丁內酯 96%結腸癌轉移相關蛋白1抗體COPS4 信號轉導蛋白亞4抗體
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