實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產品屬性：

產品介紹：

名稱    皮膚癌組織源細胞

2.組織來源：皮膚癌組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

人皮膚癌組織源細胞分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中最常見的一類。相對應的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統稱為肉瘤。有少數惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉移性等生物學特征，其發生是一個多因子、多步驟的復雜過程，分為致癌、促癌、演進三個過程，與吸煙、感染、職業暴露、環境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關。癌細胞，是一種變異的細胞，是產生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同，有無限增殖、可轉化和易轉移三大特點，能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。癌細胞除了分裂失控外（能進行多極分裂），還會局部侵入周圍正常組織甚至經由體內循環系統或淋巴系統轉移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。

5.方法簡介：

()實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的人皮膚癌組織源細胞經檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-H150

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

25mg Oligo（dT）纖維素 Oligo (dT) Cellulose 4℃保存 0.078-5 ng/mL ELISA Kit for Human DNA replication licensing factor MCM2

2 ug pCMV-SPORT6 DYX1C1 pCMV-SPORT6 DYX1C1 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Arachidonate 5-lipoxygenase

50次 柱式軟體RNAout Column

皮膚癌組織源細胞1瓶 MFC-GFP細胞株 MFC-GFP 低溫運輸和保存

NNT  核苷酸轉抗體 規格: 0.2mlHECA  HECA蛋白抗體 規格: 0.2ml

TGM2/TG2/Transglutaminase 2  谷轉胺2抗體 規格: 0.1ml

Notch3/4  跨膜受體蛋白Notch-3抗體 規格: 0.1ml

PPP2R3A  蛋白質磷酸2調節亞基3A抗體 規格: 0.2ml

AIM2  干擾素誘導蛋白AIM2抗體 規格: 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/Cy3  Cy3標記的驢抗羊IgG 規格: 0.1mlPhospho-Cyclin B1(Ser133)  磷酸化周期素B1抗體 規格: 0.1ml

PCDHA9  原鈣粘附蛋白α9抗體 規格: 0.2mlABHD4  α/β水解4抗體 規格: 0.2ml

2 ug p3×FLAG-KV2.1 p3×FLAG-KV2.1 低溫運輸，-20℃保存

ADORA2B  苷A2b受體抗體（神經生因子1受體） 規格: 0.2ml

PAPP A2  娠相關漿蛋白A2抗體 規格: 0.2ml

100次 鏈霉菌 PCR Mix 6（RPB2） Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存