實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    大鼠下頜骨成纖維細胞

2.組織來源：下頜骨組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠下頜骨成纖維細胞分離自下頜骨組織；下頜骨位于面下部，呈弓形，圍成口腔的前壁和側(cè)壁，是面部能活動的骨骼；其水平部分為下頜體，其垂直部分為下頜支，表層為骨密質(zhì)，內(nèi)部為骨松質(zhì)，與顳骨關(guān)節(jié)凹組成顳下頜關(guān)節(jié)。下頜體分內(nèi)、外兩面及上、下兩緣。下頜支分兩面、四緣及兩突。下頜支與顳骨形成關(guān)節(jié)。該關(guān)節(jié)非常靈活，可做出包括咀嚼動作在內(nèi)的多種動作下頜骨的骨小梁也順應(yīng)咀嚼肌的拉力和力傳送的方向而排列，斜向上后排列成線形；下頜骨的骨質(zhì)較致密，血供較差，除主要接受下齒槽動脈血供外，又接受來自骨表面黏骨膜動脈分支的血液供應(yīng)。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠下頜骨成纖維細胞采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的大鼠下頜骨成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R221

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

2 ug pTRE3 pTRE3 低溫運輸，-20℃保存

50次 血液DNAout Blood DNAOUT 常溫

2 ug pECFP-Peroxi pECFP-Peroxi 低溫運輸，-20℃保存

ITC肉湯添加劑 ITC Broth Additive 1ml*5

100mg 鏈脲佐菌素 Streptozocin STZ -20℃保存

營養(yǎng)瓊脂 Nutrient Agar 250g

1瓶 KG-1細胞株 KG-1 低溫運輸和保存

食品衛(wèi)生檢驗系列  

5g 吖啶橙 Acridine Orange 避光

大鼠下頜骨成纖維細胞產(chǎn)氣莢膜梭菌測定用培養(yǎng)基 英文名稱：Clostridium Perfringens Assay Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

緩沖甘油-氯化鈉溶液 英文名稱：Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒*直銷

哥倫比亞培養(yǎng)基 英文名稱：Columbia Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠卵泡抑素(FS)免疫試劑盒進口、組裝

梭菌強化培養(yǎng)基 英文名稱：Reinforced medium for clostridia 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠硫脂(SULF)抗體免疫試劑盒進口、分裝

FS培養(yǎng)基 英文名稱：FS Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

LS培養(yǎng)基 英文名稱：Lactose Sulfite Medium(LS) 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠流行性乙型腦炎(JE)抗體(IgG)免疫試劑盒*直銷

EG培養(yǎng)基 英文名稱：EG Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)免疫試劑盒進口、組裝

厭氧肉肝湯培養(yǎng)基 英文名稱：Anaerobic Beef Liver Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)免疫試劑盒進口、分裝

CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱：Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠磷脂D2(PLD2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

改良Y培養(yǎng)基 英文名稱：Agar Y，Modified 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠磷脂A2(PL-A2)免疫試劑盒*直銷