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貨號 | GOY-01S6569 |
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商品介紹
測定意義 線粒體是半自主性細胞器,不僅是細胞內氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要場所,為細胞的活動提供能量,而且在許多生命活動中具有重要調控作用。因此,準確和全面分離保持正常活性的線粒體已經成為許多研究的前提。 測定原理: 利用專門試劑溫和勻漿組織和細胞,再采用差速離心法從勻漿中分離完整線粒體;利用專門試劑,配合超聲波破碎線粒體,可以得到保持活性的線粒體酶。 需自備的儀器和用品: 超聲波破碎儀、臺式離心機、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
50管/48樣 | 差速離心法 | GOY-01S6569 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
Anti-Tubulin- Beta/FITC 熒光素標記微管蛋白抗體IgG
Anti-Tubulin- Gamma/FITC 熒光素標記微管蛋白-γ抗體IgG
Anti- Beta-Actin/HRP 辣根過氧化物標記β-肌動蛋白(抗體)
Anti-Tuberin/TSC2/FITC 熒光素標記馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體IgG
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) /FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體IgG
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387)/FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體IgG
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) /FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體IgG
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571)/FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體IgG
葉綠體分離和葉綠體酶提取差速離心法對硝標準溶液 1.02mg/ml,體:人抗中性粒胞漿抗體(cANCA)IgM 免疫試劑盒C-藻藍素/藻藍蛋白/藻青蛋白抗體Phospho-MYPT1/MBS(Ser507) 化肌球蛋白抗體
對硝 GR,99.5%人抗中性粒/中心體抗體(ACA)免疫試劑盒色素P450 1A1抗體Phospho-MYPT1(Thr696) 化肌球蛋白抗體
對硝 分析標準品,用于環境分析人抗增殖核抗原(PCNA)抗體免疫試劑盒絲/蘇氨蛋白質激II α抗體Phospho-MYPT1 (Thr853) 化肌球蛋白抗體
2,4-二硝 GR,99%(劇品)人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)免疫試劑盒2號染色體開放閱讀框66抗體Phospho-MYPT1 (Ser668) 化肌球蛋白抗體
愈創木酚 >99.0%(GC)人抗抑制素B抗體(IgG)免疫試劑盒CULLIN抗體phospho-Myosin light chain(Ser20) 化肌球蛋白輕鏈抗體
鄰二 AR,98%人抗異質型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)免疫試劑盒小牛胸腺DNA抗體phospho-MyoD1(Ser200) 化肌原調節蛋白抗體
鄰二 99%,用于生化研究人抗異亮氨氨酰tRNA連接,質(IARS)抗體免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框226抗體phospho-MYL9(Thr19) 化肌球蛋白輕鏈9抗體
香草 AR,99%人抗異亮氨tRNA連接,線粒體(IARS2)抗體免疫試劑盒組織蛋白L抗體phospho-MYL6(Tyr29+Ser30) 化肌球蛋白輕鏈6抗體
1,4-二(反式+順式) 97%人抗胰島素受體抗體(AIRA)免疫試劑盒絲/蘇氨蛋白激II β抗體(casein kinase IIβ)Phospho-MYL(Ser19) 化肌球蛋白輕鏈2抗體
順-2--1,4-二 98%人抗胰蛋白(AT)免疫試劑盒角蛋白18抗體phospho-MYF5 (phospho Ser49) 化生肌決定因子Myf5抗體
辛酰 99%人抗眼肌抗體(EMAb)免疫試劑盒轉化生長因子β1結合蛋白抗體Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) 化µ-型阿片受體抗體
反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)免疫試劑盒22號染色體開放閱讀框45抗體Phospho-mTOR (Tyr144) 化雷帕霉素靶蛋白抗體
間酰 97%人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)免疫試劑盒22號染色體開放閱讀框32抗體Phospho-mTOR (Thr2446) 化雷帕霉素靶蛋白抗體
間二酰 99%人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)免疫試劑盒CD5L抗體Phospho-mTOR (Ser2481) 化雷帕霉素靶蛋白抗體
對二酰 99%人抗血小板抗體(anti-PA Ab)免疫試劑盒(半定量)CD6抗體Phospho-Mst2(Thr180) 化蛋白激MST2抗體
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