實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產品屬性：

產品介紹：

名稱    大鼠棕色脂肪干細胞

2.組織來源：脂肪組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

大鼠棕色脂肪干細胞分離自棕色脂肪組織；動物體內存在棕色和白色兩種脂肪，白色脂肪堆積在皮下，負責儲存多余熱量；棕色脂肪負責分解引發肥胖的白色脂肪，將后者轉化成二氧化碳、水和熱量，本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色，其特點是組織中有豐富的毛細血管，脂肪細胞內散著許多小脂滴，線粒體大而豐富，核圓形，位于細胞中央，這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少，新生兒及冬眠動物較多，在新生兒主要分布在肩胛間區、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發揮作用，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫。隨著年齡增長，棕色脂肪會逐漸消失。最終，動物體內只殘存少量棕色脂肪細胞，分布于頸部和鎖骨。脂肪干細胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的干細胞，主要恢復組織細胞的修復功能，促進細胞的再生，恢復年輕面容的同時，身體機能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等疾病，由內而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優點：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對供區的創傷較小；④獲得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領域中理想的種子細胞。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠棕色脂肪干細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的大鼠棕色脂肪干細胞經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-R229

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

衛矛醇半固體  20支

2 ug pCAMBIA1305 pCAMBIA1305 低溫運輸，-20℃保存

3%NaClONPG  20支

1g  Hydroxyurea  4℃保存

L型細菌高滲鹽增菌培養基 L-Bacterial Hypertonic Salt Broth 250g

5mL 成纖維細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

10mL Agarose Gel Loading Buffer (Alkaline，堿性上樣液)，6X   Aga

大鼠棕色脂肪干細胞綠膿菌素測定用培養基（PDP） 英文名稱：Pseudomonas Agar P 產品規格：250g 小鼠過氧化物體增殖因子活化受體β(PPAR-β)免疫試劑盒現貨供應

哥倫比亞瓊脂培養基（2015藥典） 英文名稱：Columbia Blood Agar Medium 產品規格：250g 小鼠過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)免疫試劑盒*直銷

梭菌增菌培養基（2015藥典） 英文名稱：Clostridium enrichment Medium 產品規格：250g 小鼠過氧化氫(CAT)免疫試劑盒進口、組裝

1%聚酯80-玉米瓊脂培養基 英文名稱：1%Tween 80-Corn Agar Medium 產品規格：250g 小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)免疫試劑盒進口、分裝

沙氏葡萄糖瓊脂培養基 英文名稱：Sabouraud’s Glucose Agar Medium 產品規格：250g 小鼠果糖胺(FRA)免疫試劑盒現貨供應

沙氏葡萄糖液體培養基 英文名稱：Sabouraud’s Glucose Broth Medium 產品規格：250g 小鼠胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒*直銷

膽鹽硫乳瓊脂培養基 英文名稱： 產品規格：250g 小鼠胱天蛋白7(Casp-7)免疫試劑盒進口、組裝

碘液 英文名稱： 產品規格：2ml*20支 小鼠胱天蛋白5(P-5)免疫試劑盒進口、分裝

0.1%煌綠 英文名稱： 產品規格：1ml*20 小鼠胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒現貨供應

氯化鈉瓊脂培養基 英文名稱：Mannitol Salt Agar Medium 產品規格：250g 小鼠胱天蛋白10(P-10)免疫試劑盒*直銷