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貨號 | GOY-01S6875 |
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商品介紹
測定意義 漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。 測定原理 漆酶分解底物ABTS產生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數遠大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。 自備實驗用品及儀器 天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、震蕩儀。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
50管/24樣 | 可見分光光度法 | GOY-01S6875 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
2,2-二甲基己烷 98%豐度:10atom%;化學純度:≥98%TLR-9/CD289(Human Toll-like receptor 9) ELISA kit 人Toll樣受體9
N,N-二甲基對苯二 98%豐度:99atom%;化學純度:≥98%TGF Beta2(Human transforming growth factors Beta2) ELISA Kit 人轉化生長因子β2
二亞乙基三五乙酸二酐 98%豐度:10atom%;化學純度:≥98%MCP-4/CCL13(Human monocyte chemotactic protein 4) ELISA kit 人單核趨化蛋白4
1,12-二十二烷 98%豐度:99atom%;化學純度:≥98% LTD4(Human leukotriene D4) ELISA Kit 人白三烯D4
1,7-二溴庚烷 98%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%N-Cad(Human Neural-Cadherin) ELISA kit 人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白
間二氯芐 97%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%HB-EGF(Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor) ELISA Kit 人肝素結合性因子
2,2'-二硫雙(5-硝基吡) 97%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5% ESF(Human erythropoiesis stimulating factor) ELISA Kit 人紅激因子
3,3'-二硫代二酸 99%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%TRANCE(Human TNF related activation induced cytokine) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子
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