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測定意義

葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose 6 phosphatase，G6Pase，EC 3.1.3.9）廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中，是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。

測定原理：

G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖，變旋酶和葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NAD+還原生成NADH，在340nm下測定NADH生成速率，即可反映G6P活性。

需自備的儀器和用品：

分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

D-蘋果酸 99%聚乙二單甲 均分子量750 Anti-CBP/FITC  熒光素標記CREB結合蛋白抗體IgG

DL-正纈 99%聚乙二單甲 平均分子量500Anti-CBX3/FITC  熒光素標記染色盒同源物3抗體IgG

D-正纈 99%壬基酚聚氧乙烯(NP 40) ~10% in H2OAnti-CBX5/FITC  熒光素標記CBX5抗體IgG

L-正纈 99% CPAnti-Cbx8/FITC  熒光素標記染色質結合蛋白Cbx8抗體IgG

D-苯甲酯鹽酸鹽 98%99%Anti-CC16/FITC  熒光素標記克拉拉蛋白(Clara分泌蛋白)抗體IgG

D-苯甘乙酯鹽酸鹽 99% 99.8%，藥用級Anti-CCK8/FITC  熒光素標記膽囊收縮素/縮膽囊素抗體(八肽)

DL-脯 99%聚乙二 average Mn 200Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC  熒光素標記嗜酸粒趨化蛋白CCL1抗體IgG

L-焦谷 97%聚乙二 average Mn 1000Anti-CCL3/MIP-1 Alpha/FITC  熒光素標記巨噬炎性蛋白1α抗體IgG

葡萄糖6磷酸酶（G6P)微量法檢測試劑盒小鼠胰島素原(PI)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠25羥基D3(25 HVD3)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠促胰液素/胰泌素(Sct)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)免疫試劑盒現貨供應

小鼠肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)免疫試劑盒*直銷

大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠24S-羥化(CYP46)免疫試劑盒*直銷

大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)免疫試劑盒進口、分裝

犬血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒進口、組裝

單絲蛋白激1(LIMK1)免疫試劑盒進口、組裝

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。