當前位置:上海谷研實業有限公司>>生化檢測試劑盒>>其它系列>> 雙縮脲法蛋白含量微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6964 |
---|
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
商品屬性:
產品名稱 | |
規格 | 100管/96樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6964 |
商品介紹:
測定意義
強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物;紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質,適用于蛋白質濃度高的樣品,尤其是動物材料。
試劑組成和配置
1、雙縮脲試劑×1瓶,4℃保存;
2、10mg/ml標準蛋白×1支,-20℃保存;
3、標準蛋白配制:取10mg/ml標準蛋白100μl加雙蒸水100μl,即得5mg/ml標準蛋白溶液。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
叔丁 CP2-異基苯 97%anti-CKIP-1 酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體
三(4-基) 97%S(-)-2-甲基-1-丁 98%Anti-CKMT2 肌酸激2抗體
烯酰氯, 96%,含~0.05% 噻吩穩定劑D-脯甲酯鹽酸鹽 97%Anti-Clostridium perfringens type D D型產氣莢膜梭菌抗體
乙酰氯 AR,98.5%吡-N-氧化物 95%Anti-CITED1/ABCC1 結合轉化激活因子CITED1抗體
正丁酰氯 98%(S)-(-)-1, 2, 4-丁三 98%Anti-CLCA4 鈣激活氯離子通道4抗體
氯代異烷 CP,97%L-乙酯鹽酸鹽 99%Anti-CLEC1/CLEC1A C型凝集素結構域家族1成員A抗體
氯代異烷 GR,99%D-色氨 97%Anti-CLEC2/CLEC1B C型凝集素結構域家族1成員B抗體
氯乙酰氯 98%1-(2,4,6-三異基苯基磺酰)咪唑 98%Anti-C-Mer/MERTK c-mer原癌基因激抗體
雙縮脲法蛋白含量微量法檢測試劑盒硫酸褪黑色素(MS)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)免疫試劑盒進口、分裝
山羊白介素2(IL-2)免疫試劑盒現貨供應
兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)免疫試劑盒進口、組裝
豬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠戊糖素(Pentosidine)免疫試劑盒進口、組裝
豬游離三碘甲狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒進口、組裝
Adropin(ENHO)免疫試劑盒*直銷
大鼠總(TB)免疫試劑盒進口、組裝
豬Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒進口、組裝
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。