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脂質過氧化物(LPO)可見分光光度法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-24 13:52:51瀏覽次數:179次

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貨號 GOY-01S6412
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操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

28.png 

商品屬性:

產品名稱

脂質過氧化物(LPO)可見分光光度法

規格

50管/48樣

檢測方法

可見分光光度法

貨號

GOY-01S6412

商品介紹:

測定意義

脂質過氧化是動植物體內活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質過氧化物(LPO)是脂質過氧化過程的產物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關的多不飽和脂肪酸的側鏈及核酸等大分子物質起脂質過氧化反應形成LPO,使細胞膜的流動性和通透性發生改變,最終導致細胞結構和功能的改變。因此,LPO常被作為機體氧化應激的一種指標,與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關。

測定原理:

LPO在酸性條件下加熱,產生小分子終產物MDA,MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產物,在535nm有最大吸收峰。

需自備的儀器和用品:

分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

亮抑肽Anti-ADGRG5 Antibody杏葉防風Apricot?Leaves wind

促胃泌素釋放肽(抗原)Anti-ADGRF5 Antibody蒺藜Tribulus terrestris

牛血清白蛋白(標準)Anti-ADGRG1 Antibody玳瑁Tortoise shell

髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠Anti-ADGRG5 AntibodyDonkFS- hide gelatin

血管活性腸肽Anti-ADGRG6 AntibodyLindera

Anti-ADGRL2 Antibody買麻藤(小葉買麻藤)Gnetum?(Oba

胰高血糖素樣肽-2蛋白Anti-ADGRL1 Antibody固公果根Radix Rosae giganteae

活性依賴的神經保護肽(抗原)Anti-ADGRL4 Antibody荷葉Lotus leaf

脂質過氧化物(LPO)可見分光光度法二芐酮 99%人Toll樣受體2(TLR2)免疫試劑盒蓬亂蛋白1抗體PAFAH1B3/PAFAHG  血小板衍化生長因子γ抗體

3,5-二芐溴 98%人Toll樣受體1(TLR1)免疫試劑盒肌Dystrobrevin β蛋白抗體PAFAH1B2  血小板衍化生長因子β抗體

二乙酮 98%人TH糖蛋白(THP)免疫試劑盒異常原/脫-γ-羧原抗體PAF  血小板活化因子抗體

四庚 PIC人TGF-β誘導早期因1(TIEG1)免疫試劑盒結蛋白抗體PADI4  關節炎相關因抗體

咪唑 99%人Tau蛋白免疫試劑盒DISC1 C端抗體PACRG  麻瘋病和帕金森氏病共同調節蛋白抗體

4-咪唑 98%人TAR DNA結合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫試劑盒DISC1 N端抗體PACAP-38  腺苷環化激活肽-38抗體

1,2-并異噻唑啉-3-酮 98%人s腺苷同型半胱氨(SAH)免疫試劑盒多能發育相關因2抗體PACAP-27/38  腺苷環化激活肽-27/38抗體

2, 2’-二硫代二 98%人Syndecan-3/(SDC3)免疫試劑盒結腸直腸癌缺失因抗體PACAP R1  腺苷環化激活肽受體1抗體

三乙酯 99%人Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫試劑盒多巴脫羧抗體PABP (Methyl Arg455/460)  化多聚腺苷結合蛋白抗體

99%人SWI/SNF相關, 質關聯,肌動蛋白依賴染色質調控因子,亞家族c,成員1(SMARCC1)免疫試劑盒防御素β1/Defensin β1抗體PABP  多聚腺苷結合蛋白抗體

97%人STEAP家族成員4(Steap4)免疫試劑盒抗體P95/NBS1  DNA修復蛋白NBS1抗體

L-a-氨己二 98%人STEAP家族成員1(Steap1)免疫試劑盒DLX4抗體p95 NBS1/Cell cycle regulatory protein p95  周期調節蛋白P95抗體

過氧化鈉 ACS reagent, ≥93.0%人Stathmin 1(STMN1)免疫試劑盒DTX1抗體P73 protein  P73腫瘤抑制因抗體

硫辛 分析標準品,≥98%人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)免疫試劑盒絲裂原活化蛋白激-1抗體p73 alpha  p53相關蛋白P73α抗體

黃芪皂苷 III  分析標準品,≥98%人Spondin-2 免疫試劑盒絲裂原活化蛋白激-2抗體p70 S6 Kinase Beta 2/P70 Beta 2  核糖體S6蛋白激β2抗體


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