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| 貨號 | GOY-01X1068 |
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公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 神經少突膠質細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X1068 |
商品介紹：
名稱 神經少突膠質細胞 2.組織來源：腦組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 人神經少突膠質細胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質細胞分布于中樞神經系統，在銀浸染標本中，少突膠質細胞比星狀膠質細胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質細胞，其突起并不少，而且還有許多分支。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經系統中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構、協助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經系統脫髓鞘病變，還會引起神經元損傷或精神類疾病，甚至可以引發腦腫瘤。根據少突膠質細胞的分布和位置可分為三種：①束間少突膠質細胞（interfasicular-oligodendrocyte），分布在中樞神經系統的白質的神經纖維束之間；②神經細胞周少突膠質細胞（perineuronal-oligodendrocyte），分布在中樞神經系統的灰質區，常位于神經細胞周圍，與神經細胞的關系密切，故又稱為神經細胞周衛星細胞（perineuronal-satellite-cell），但在神經細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質細胞的薄片狀突起分隔；③血管周少突膠質細胞（pcrivascular-oligodendrocyte），主要分布在中樞神經系統內的血管周圍。少突膠質細胞形成的髓鞘膜是最為特化和復雜動物細胞膜之一，其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩定結構。如半乳糖腦苷脂（GC），它是髓鞘的一種主要類脂，用GC抗體鑒別成熟的少突膠質細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來，神經發育學科進展較快，更多的少突膠質細胞分子標記物被鑒定出來，如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。 5.方法簡介： ()實驗室分離的人神經少突膠質細胞采用消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： ()實驗室分離的人神經少突膠質細胞經GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H121 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25% 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2 ug pSP64 pSP64 低溫運輸，-20℃保存 0.625-40 ng/mL 人生長分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒
400U RNase抑制劑（人源） Human RNase Inhibitor -20℃保存 0.625-40 ng/mL 大鼠肥大細胞蛋白Ⅱ(Mcpt2)ELISA試劑盒
2 ug pCMV-SPORT6 PPP2R3A pCMV-SPORT6 PPP2R3A 低溫運輸，-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Low-dens
神經少突膠質細胞PRRSV M protein 豬藍耳毒M蛋白抗體 1ml
1瓶 DCS (肉瘤細胞)細胞株 DCS (肉瘤細胞) 低溫運輸和保存
50T 凋亡抑制蛋白Livin基因PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
Klotho Klotho多肽蛋白抗體 規格: 0.1mlNck1/NCK alpha NCK銜接蛋白1抗體 規格: 0.2ml
2 ug pCMV-SPORT6 SNAP25 pCMV-SPORT6 SNAP25 低溫運輸，-20℃保存
含225ml堿性蛋白胨水均質袋 Alkaline peptone water 10個/包
30µL α-Actin小鼠單抗 α-Actin Mouse MAb -20℃保存
250ml Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB) Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB) 常溫保存
酵母浸粉 Yeast Extract Powder 250g
50U Furin 蛋白 Furin Protease -20℃保存
100g DNCTAB(十六烷基基)
Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗大鼠IgG 規格: 0.1ml
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