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抗壞血酸過氧化物酶(APX)微量法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-24 13:41:35瀏覽次數:193次

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貨號 GOY-01S6395
抗壞血酸過氧化物酶(APX)微量法公司正在出售的產品:小鼠受體(TR)ELISA Kit,48T/96T
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測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

抗壞血酸過氧化物酶(APX)微量法

100管/96樣

微量法

GOY-01S6395

商品介紹

測定意義

APX是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一,也是抗壞血酸代謝的關鍵酶之一。APX具有多種同功酶,分別定位于葉綠體、胞質、線粒體、過氧化物和乙醛酸體,以及過氧化體和類囊體膜上。APX 催化H2O2氧化AsA,是植 AsA 的主要消耗者。APX的活性直接影響到AsA的含量,APXAsA具有一定的負相關性。

測定原理:

APX 催化催化H2O2氧化AsA,通過測定AsA氧化速率,來計算得APX活性。

自備儀器用品:

低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、移液槍、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。

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對硝 GR,99.5%Anti-Phospho-TCTP (Ser46)  化翻譯控制腫瘤蛋白抗體小鼠白介素27(IL-27)聯免疫吸附測定試劑盒

對硝 分析標準品,用于環境分析Anti-TDP-43  Tar DNA 結合蛋白43抗體小鼠白介素35(IL-35)聯免疫吸附測定試劑盒

2,4-二硝 GR,99%(劇品)Anti-PHLDA1/TDAG51  T淋巴凋亡相關蛋白TDAG51抗體小鼠白介素2受體(IL-2R)聯免疫吸附測定試劑盒

愈創木酚  >99.0%(GC)Anti-TEM 1/CD248  內涎蛋白/內皮唾液蛋白抗體小鼠腸脂肪結合蛋白(IFABP/FABP2)聯免疫吸附測定試劑盒

鄰二 AR,98%Anti-TEM8  腫瘤血管內皮標志物8抗體小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)聯免疫吸附測定試劑盒

鄰二 99%,用于生化研究Anti-TERT  端粒逆轉錄抗體小鼠白介素32(IL-32)聯免疫吸附測定試劑盒

香草 AR,99%Anti-TETRODOTOXIN ( TTX )  抗體小鼠白介素18結合蛋白(IL18BP)聯免疫吸附測定試劑盒

1,4-二(反式+順式) 97%Anti-TP-1/TEP1  端粒相關蛋白1抗體小鼠雙調蛋白(AR)聯免疫吸附測定試劑盒

-2--1,4-二 98%Anti-Tetraspan5  四分子交聯體5抗體小鼠腎損傷分子1(KIM-1)聯免疫吸附測定試劑盒

辛酰 99%Anti-TFF2  三葉肽因子2抗體小鼠脫氫(LDH)聯免疫吸附測定試劑盒

,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)Anti-TFF3  三葉肽因子3抗體小鼠鐵傳遞蛋白/鐵蛋白(LF/LTF)聯免疫吸附測定試劑盒

間酰 97%Anti-TIF1 Alpha/TRIM24  轉錄中介因子Tif1α抗體小鼠層粘蛋白(LN)聯免疫吸附測定試劑盒

間二酰 99%Anti-TIF1 beta/KAP1  轉錄中介因子Tif1β抗體小鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)聯免疫吸附測定試劑盒

對二酰 99%Anti-Phospho-TIF1beta (Ser824)  化轉錄中介因子Tif1β抗體小鼠瘦素受體(LEPR)聯免疫吸附測定試劑盒

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