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DMEM 無酚紅培養基

參  考  價:1 - 560 /盒
具體成交價以合同協議為準
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    上海市

更新時間:2025-05-30 16:38:03瀏覽次數:199次

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保存條件 2-8℃、避光 貨號 GOY-XP5170
產品規格 500ml 用途 僅供科研實驗
DMEM 無酚紅培養基無酚紅干擾:不含酚紅,適用于激素敏感型細胞(如乳腺腫瘤細胞)或熒光染色、流式細胞術等需避免色素干擾的實驗,保留DMEM的高糖營養體系。

DMEM 無酚紅培養基

產品介紹:

DMEM 無酚紅培養基 

產品介紹

DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基,是在MEM培養基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(4500mg/L)和低糖型(1000mg/L)。

DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫,所以其特點主要包括以下:

(1)氨基酸含量為依格爾培養基的2倍,且含有非必需氨基酸;

(2)維生素含量為依格爾培養基的4倍;

(3)含有糖酵解途徑中的重要物質——丙酮酸;

(4)含有微量的鐵離子。

培養基主要成份表

 含有(+)

  (+)   D-葡萄糖

(+)   丙酮酸鈉

  (+)   L-谷氨酰an

不含(-)

  (-)  HEPES

(-)   酚 紅


規格

500ml

保存條件

2-8℃、避光

貨號

GOY-XP5170

用途

僅供科研研究實驗

運輸和保存:

DMEM 無酚紅培養基

放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸(儲存條件2-8℃ 避光儲存)產品保質期12個月。

注意事項:

DMEM 無酚紅培養基
1、收到產品請先檢查包裝是否完好,如有破損,漏液、渾濁等現象請及時聯系我們,培養基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響產品正常使用。

2、請仔細閱讀產品說明書,了解產品使用方法、保存方式、有效期等信息,若因操作失誤,保存不當而導致產品出現污染等問題的,責任由客戶自行承擔。

3、本產品僅能用于科研,培養基中的一些組分對人體有較低的危害性,如有接觸立即用大量清水沖洗即可。

培養操作:

DMEM 無酚紅培養基
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

實驗報告:

DMEM 無酚紅培養基
一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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