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產地	進口	加工定制	否
適用領域	其他

操作方法：
一、EPI300 電擊感受態細胞50ul*5說明書熱激轉化法
1.    從-80℃冰箱取出感受態細胞冰浴融化后，吸取100μl感受態細胞轉移到-20℃過夜預冷的搖菌管中，加入質粒或連接產物，輕輕混勻，冰浴30分鐘。
2.    42℃水浴熱激60秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，該過程不要搖動搖菌管。
3.    向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB（SOC培養基可提高2-3倍轉化效率），37℃、180rpm、45分鐘復蘇菌種。
4. 根據實驗要求（質粒，重組連接產物轉化），吸取不同體積已轉化的感受態細胞加到含相應抗生素的LB瓊脂培養基上，將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收，倒置平板，37℃過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
二、10分鐘快速轉化法
注：在使用卡那霉素，四環素等作為篩選抗性時，需要在SOC培養基中復蘇以提高轉化效率，當使用氨芐青霉素作為篩選抗性時，該步驟可以省略。感受態細胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養基，在37℃ 180rpm孵育1小時，然后轉移到37℃預熱的LB培養基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養基平板拿到37℃預熱。
2. DH 5α感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻，冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態細胞-DNA混合物轉移到已經37℃預熱的LB培養基上，涂均勻，表面無水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。

使用說明：
1． EPI300 電擊感受態細胞50ul*5說明書取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。
3． 42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。
4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12~16h。

培養方法：
EPI300 電擊感受態細胞50ul*5說明書收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況，如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，留10ml培養液繼續培養。
培養實驗又要開始了，科研工作者又該忙碌了，大家可能都在尋找適合自己的細胞，不用急，我們幫您掌舵，讓您滿意！
傳代方法：細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶，加培養基混勻分瓶，T25瓶中加培養基至6-8ml，T75瓶加培養基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養。
中文名稱：EPI300 電擊感受態細胞50ul*5說明書
規格：50ul*5
用途：生化試劑。（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

ELISA Kit for Human Dentin matrix acidic phosphoprotein 1