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肌酸激酶(CK)紫外分光光度法檢測試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-24 12:12:09瀏覽次數:259次

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貨號 GOY-01S6364
肌酸激酶(CK)紫外分光光度法檢測試劑盒公司正在出售的產品:小鼠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit,48T/96T
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選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

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商品屬性:

產品名稱

肌酸激酶(CK)紫外分光光度法檢測試劑盒

規格

50管/48樣

檢測方法

紫外分光光度法

貨號

GOY-01S6364

商品介紹:

測定意義

CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中,能可逆地催化肌酸與ATP之間的轉磷酰基反應,在能量運轉、肌肉收縮和ATP再生中有重要作用,是臨床診斷心腦疾病的一個重要指標。

測定原理:

CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP與葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化6-磷酸葡萄糖與NADP+生成NADPH,導致340nm光吸收值增加。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、1mL石英比色皿和蒸餾水。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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二乙膦酰乙叔丁酯 95%Anti-MIP2/GRO Beta/CXCL2  巨噬炎癥蛋白2( GROβ)抗體人接觸蛋白2(CNTN2)聯免疫吸附測定試劑盒

2-溴-4-氟 98%Anti-GRO gamma/CXCL3  生長調節致癌因gamma(GROγ)抗體人接觸蛋白3(CNTN3)聯免疫吸附測定試劑盒

4-溴水楊 97%Anti-CXCL4/PF-4  血小板因子4抗體人接觸蛋白4(CNTN4)聯免疫吸附測定試劑盒

4-溴-2-(三氟) 97%Anti-CXCL5  上皮中性粒活化肽78抗體人接觸蛋白相關蛋白1(CNTNAP1)聯免疫吸附測定試劑盒

3-溴 98%Anti-GRP  促胃泌素釋放肽抗體人接觸蛋白相關蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)聯免疫吸附測定試劑盒

5- 99%Anti-GRP78  葡萄糖調節蛋白78抗體(熱休克蛋白70蛋白5)人接頭蛋白2(ELMO2)聯免疫吸附測定試劑盒

2-異煙 97%Anti-GRP94/gp96  葡萄糖調節蛋白94抗體人結蛋白(Des)聯免疫吸附測定試劑盒

肉桂酰 97%Anti-GSK-3 alpha  葡萄糖合成激-3α抗體人結構特異性識別蛋白1(SSRP1)聯免疫吸附測定試劑盒

3-肉桂 98%Anti-Phospho GSK3 alpha (Ser21)  化葡萄糖合成激3α抗體人結合珠蛋白(HP)聯免疫吸附測定試劑盒

2-芐 99%Anti-Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641)  化葡萄糖合成1抗體人觸珠蛋白相關蛋白(HPR)聯免疫吸附測定試劑盒

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2--5- 97%Anti-GSK-3 Beta (CT)  葡萄糖合成激-3β抗體人轉運蛋白2(TNPO2)聯免疫吸附測定試劑盒

4- 98%Anti-phospho-GSK-3 Beta(Ser9)  化葡萄糖合成激3β抗體人線粒體解偶聯蛋白2(UCP-2)聯免疫吸附測定試劑盒

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