產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    大鼠神經(jīng)少突膠質前體細胞

2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠神經(jīng)少突膠質前體細胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質。少突膠質細胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在銀浸染標本中，少突膠質細胞比星狀膠質細胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。少突膠質細胞（oligodendrocyte）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的成髓鞘神經(jīng)膠質細胞，其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質細胞祖細胞、前少突膠質細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質細胞等階段。有學者將少突膠質細胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是，細胞發(fā)育是一個連續(xù)的過程，其形態(tài)、表達產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴格的界限，因此，其分類是相對的。這三型分別為：Ⅰ型少突膠質細胞又稱前O2A（pre-O2A progenitor cell）。細胞呈圓形，表面光滑，直徑約3μm，體外混合培養(yǎng)時成簇生長在星形膠質表面，具有很強的分裂增殖潛力，表達GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子（polysialic acid-neural cell adhesion molecule，PSA-NCAM）等。Ⅱ型少突膠質細胞胞體常有雙極或三極突起，極少數(shù)為單極突起，直徑約7μm，有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時為雙潛能細胞，既可分化為少突膠質細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質，故又稱為少突膠質細胞-Ⅱ型星形膠質祖細胞（oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell，O2A）。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達GD3和GQ（淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體），故常用A2B5抗體標記O2A。Ⅲ型少突膠質細胞不再具有分裂增殖能力，為分裂終期細胞。直徑約10μm。根據(jù)其形成髓鞘的能力，又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質細胞。不成熟的OL胞體常伸出4～5條較粗大突起，表面還殘留有A2B5標記物，同時也表達O1-O4抗原，無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質細胞突起有如蜘蛛網(wǎng)，大量表達半乳糖腦苷脂（galactocerebro side，GC）、蛋白脂蛋白（proteio lipid protein，PLP）、髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）等，有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質細胞前體細胞（簡稱少突膠質細胞前體細胞）包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質細胞，前兩者具有增殖能力。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質細胞采用消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶

6.質量檢測：

()實驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質前體細胞經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含B-27、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R308

換液頻率每2-3天換液一次；

生長特性貼壁

細胞形態(tài)雙極、多極形

傳代特性不傳代，不增殖，存活1-2周

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

組織Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

細胞Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

組織Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

細胞Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

組織Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

細胞AURORA-A激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

組織AURORA-A激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

細胞AURORA-B激酶活性

大鼠神經(jīng)少突膠質前體細胞營養(yǎng)肉湯 (NB)   進口、國產(chǎn)Nutrient Broth一般細菌培養(yǎng)、轉種、復壯、增菌等(GB標準)250兔子前列腺素A2 免疫試劑盒進口、組裝

營養(yǎng)瓊脂 (NA)   進口、國產(chǎn)Nutrient Agar細菌計數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎和傳代用(GB標準)250兔子前列腺素A1 免疫試劑盒進口、分裝

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基     進口、國產(chǎn)Lactose Bile Broth用于大腸菌群，糞大腸菌群，大腸桿菌的測定(GB標準)250兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

乳糖復發(fā)酵培養(yǎng)基    進口、國產(chǎn)Lactose Broth用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標準)250兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)免疫試劑盒*直銷

去氧膽酸鹽瓊脂     進口、國產(chǎn)Desoxycholate Lactose Agar用于大腸桿菌固體平板測定,腸道菌選擇性分離250兔子皮質酮(CORT)免疫試劑盒進口、組裝

MR-VP培養(yǎng)基     進口、國產(chǎn)Methyl Red Voges Proskauer Broth用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(SN標準)250兔子(Cortisol)免疫試劑盒進口、分裝

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂 (VRBA)    進口、國產(chǎn)Violet Red Bile Agar用于大腸菌群的固體平板檢測(SN標準)250兔子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂     進口、國產(chǎn)Simmons Citrate Agar用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(GB標準)250兔子黏多糖/糖胺聚糖免疫試劑盒*直銷

腸道菌計數(shù)瓊脂 (VRBDA)     進口、國產(chǎn)Violet Red Bile Dextrose Agar  用于腸道菌計數(shù)和腸桿菌科鑒別(MERCK方法)250兔子腦鈉素(BNP)免疫試劑盒進口、組裝

菌種保存培養(yǎng)基   進口、國產(chǎn)Strain Store Medium用于常用細菌斜面?zhèn)鞔笆覝乇４?50兔子內(nèi)皮抑素(ES)免疫試劑盒進口、分裝

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。