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副結核分支桿菌PCR檢測試劑盒說明書

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更新時間:2019-04-18 10:26:01瀏覽次數:231次

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副結核分支桿菌PCR檢測試劑盒說明書用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

組成及試劑配制:
1、副結核分支桿菌PCR檢測試劑盒說明書酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

產品名稱英文名稱價格
副結核分支桿菌PCR檢測試劑盒說明書Abalone Spherical VirusPCR電詢


樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球將試管塞緊后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數),振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環參數設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。

δLK1 ELISA Kit白細胞介素-10抗體δ樣蛋白1同源物(δLK1)ELISA試劑盒
δSIP ELISA Kit白介素6抗體δ-促睡眠肽(δSIP)ELISA試劑盒
γGT1 ELISA Kit磷酸化內質網核信號轉導蛋白a1抗體γ-谷氨酰轉移酶1(γGT1)ELISA試劑盒
γGH ELISA Kit白細胞介素28受體抗體γ-谷氨酰水解酶(γGH)ELISA試劑盒
γGT7 ELISA KitKB抑制蛋白激酶Ζ抗體γ-谷氨酰基轉氨酶7(γGT7)ELISA試劑盒
γGT6 ELISA Kit胰島素基因增強結合蛋白1抗體γ-谷氨酰基轉氨酶6(γGT6)ELISA試劑盒
γGT5 ELISA Kit整合素β1結合蛋白2抗體γ-谷氨酰基轉氨酶5(γGT5)ELISA試劑盒
γGT3 ELISA Kit線粒體翻譯起始因子3抗體γ-谷氨酰基轉氨酶3(γGT3)ELISA試劑盒
γGT2 ELISA Kit白細胞介素27β抗體γ-谷氨酰基轉氨酶2(γGT2)ELISA試劑盒
γGCT ELISA Kit胰島素樣生長因子1受體抗體γ-谷氨酰環化轉移酶(γGCT)ELISA試劑盒
γLPH ELISA KitFBXL11蛋白抗體γ-促脂解激素(γLPH)ELISA試劑盒
γABA ELISA Kit免疫球蛋白超家族成員21抗體γ-氨基丁酸(γABA)ELISA試劑盒
βTG ELISA Kit白介素9抗體β-血小板球蛋白(βTG)ELISA試劑盒
βTC ELISA Kit乙酰乳酸合成酶蛋白抗體β細胞素(βTC)ELISA試劑盒
βACE2 ELISA Kit異檸檬酸脫氫酶1抗體β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(βACE2)ELISA試劑盒
βACE1 ELISA KitIKK激酶相互作用蛋白抗體β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)ELISA試劑盒
OHβ ELISA Kit磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體β-羥丁酸(OHβ)ELISA試劑盒
βEP ELISA Kit白介素8抗體β-內啡肽(βEP)ELISA試劑盒
βCTx ELISA KitIroquois同源蛋白5抗體β-骨膠原交聯(βCTx)ELISA試劑盒
βLPH ELISA Kit整合素αE抗體Integrin αEβ-促脂素(βLPH)ELISA試劑盒
β2M ELISA Kit細胞間粘附分子-2抗體β2-微球蛋白(β2M)ELISA試劑盒
β4GALT1 ELISA Kit整合素β3抗體β-1,4-半乳糖轉移酶1(β4GALT1)ELISA試劑盒
β4GALNT2 ELISA Kit整合素α4抗體β-1,4-N-乙酰半乳糖胺基轉移酶2(β4GALNT2)ELISA試劑盒
β3GAT1 ELISA Kit白介素15抗體β-1,3-葡糖醛酸基移酶1(β3GAT1)ELISA試劑盒
αHSP ELISA Kit磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體α-血紅蛋白穩定蛋白(αHSP)ELISA試劑盒
αLA ELISA Kit一氧化氮合成酶-2抗體α-乳清蛋白(αLA)ELISA試劑盒
αEP ELISA Kit干擾素α6抗體α-內啡肽(αEP)ELISA試劑盒
αMSH ELISA Kit整合素β2/Integrin β2抗體α-黑色素細胞刺激素(αMSH)ELISA試劑盒
αCTx ELISA Kit抑制素A/Inhibin βA抗體α-骨膠原交聯(αCTx)ELISA試劑盒
SPTAN1 ELISA Kit胰島素受體底物-3抗體α-胞襯蛋白(SPTAN1)ELISA試劑盒
AFM ELISA Kit胰島素受體底物p53蛋白抗體α白蛋白(AFM)ELISA試劑盒
α2PI ELISA Kit胰島素受體底物-1抗體α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)ELISA試劑盒
α2ML1 ELISA Kit胰島素受體底物-2抗體α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)ELISA試劑盒
α2M ELISA Kit胰島素受體底物-4抗體α2-巨球蛋白(α2M)ELISA試劑盒
αHSG ELISA Kit白介素14抗體α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒
α1M ELISA Kit腫瘤細胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒
α1AGP ELISA KitCaspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA試劑盒
α1ACT ELISA Kit胰島素受體α抗體α1-抗胰糜蛋白酶(α1ACT)ELISA試劑盒
α1AT ELISA Kit整合素α3β1抗體α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA試劑盒
α1BG ELISA Kit整合素β7抗體α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA試劑盒
ZIN ELISA Kit支架蛋白抗體Zinedin蛋白(ZIN)ELISA試劑盒
EZH2 ELISA Kit非洲爪蟾IGC抗體Zeste同源物增強子2(EZH2)ELISA試劑盒
EZH1 ELISA Kit干擾素誘導跨膜蛋白1抗體Zeste同源物增強子1(EZH1)ELISA試劑盒
SUZ12 ELISA Kit干擾素β抗體Zeste12同源物1抑制因子2(SUZ12)ELISA試劑盒
Tβ4Y ELISA Kitγ-干擾素/γ-IFN單克隆抗體Y-染色體胸腺素β4(Tβ4Y)ELISA試劑盒
PYY3 ELISA Kit干擾素-γ/IFN-γ抗體YY肽3(PYY3)ELISA試劑盒

反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

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