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大鼠脊髓神經干細胞

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更新時間:2022-05-23 15:34:40瀏覽次數:258次

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原代細胞
貨號 GOY-01X1407
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大鼠脊髓神經干細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

原代細胞

GOY-01X1407

產品介紹:

名稱    大鼠脊髓神經干細胞

2.組織來源:脊髓組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠脊髓神經干細胞分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區,主要由神經細胞構成;在灰質區周圍為白質區,主要由有髓神經纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節,31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。神經干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞。需要強調的是,在腦脊髓等所有神經組織中,不同的神經干細胞類型產生的子代細胞種類不同,分布也不同。神經干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。神經干細胞在疾病、損傷狀態下具有增殖、遷移,并向神經細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,已成為神經系統損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩定的神經干細胞培養模型是其基礎和臨床應用的前提。神經干細胞在培養3-4d后,可形成神經球,神經球在培養基中呈懸浮生長。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠脊髓神經干細胞采用消化后差速貼壁,結合神經干細胞專用培養基培養篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠脊髓神經干細胞經Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-R313

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細胞形態球形

傳代特性可傳2-3代

消化液0.25%,Accutase

培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

處理方法:

收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯系。并進行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存(40×,100×,200×各一張)。

5. ①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。88.jpg

實驗操作步驟:  

a.采用認可的方案處死嚙齒動物。

b.立即在無菌超凈臺內用70%乙醇擦洗整個動物。

c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養皿上。

e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項:

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優化實驗條件,取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

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細胞培養的優點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;

適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

 


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