選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價。
產(chǎn)品名稱：大鼠花生四烯酸(AA)elisa試劑盒
英文名稱：Rat Arachidonic Acid,AA ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時）；-20℃（長時間不用時）。
有效期： 6 個月(4℃)；12 個月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　熱帶假絲酵母　1g

轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　微紅微球菌屬　250mg

蛋白激酶Bβ(PKBβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　白僵菌　25g

白介素2受體α(IL2Rα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　地衣芽孢桿菌　5g

絲裂原激活蛋白激酶激酶6(MAP2K6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　阿舒假囊酵母　1g

血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　米曲霉　5g

表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白D(SPD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　泡盛曲霉變種　1g

吡哆醛激酶(PDXK)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　植物乳桿菌　5g

CD163分子(CD163)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　核盤菌　1g

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5B(STAT5B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　溶血不動桿菌　5g

生長分化因子2(GDF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　短穩(wěn)桿菌　25g

癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　異常漢遜酵母　5g

B-細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　>98.0%(GC)　枯草芽孢桿菌　1g

胱天蛋白酶4(P4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　>98.0%(GC)　黑根霉　250mg

激活STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　釀酒酵母　10g

信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　米根霉　250g

泛素D(UBD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　99%　枯草芽孢桿菌枯草亞種　50g

血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　美澳型核果褐腐病菌　100g
大鼠花生四烯酸(AA)elisa試劑盒熒光標(biāo)記法組織端粒酶活性TRAP電泳分析　KRT34 　1 Kit

銀染法細(xì)胞端粒酶活性TRAP電泳分析　KRT36 　100 ul

銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析　KLHL4 　100 ul

溴化啶細(xì)胞染色法端粒酶活性TRAP電泳分析　KLHL9 　100 ul

溴化啶組織染色法端粒酶活性TRAP電泳分析　KLRF1 　100 ul

SYBR綠染法細(xì)胞端粒酶活性TRAP電泳分析　KRT40 　100 ul

SYBR綠染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析　KPNA1 　100 ul

通用型DNA損傷彗星　KLRG1 　100 ul

通用型DNA損傷彗星檢測*（熒光染色）　KLHL28 　1 Kit

通用型DNA損傷彗星檢測*（銀染）　KLHL21 　100 ul

DNA損傷彗星中性檢測*（熒光染色）　KLHL22 　100 ul

DNA損傷彗星中性檢測*（銀染）　KLHL29 　100 ul

過氧化氫處理DNA損傷彗星熒光　KLHDC3 　100 ul

內(nèi)切核酸酶III處理DNA損傷彗星熒光　KLHL3 　1 Kit

FGP處理DNA損傷彗星熒光　KLHL31 　100 ul

紫外線處理DNA損傷彗星熒光　KLHDC4 　300 ul
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。