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組成及試劑配制:
1、腸道腺病毒(EADV)核酸檢測試劑盒說明書價格酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
埃博拉病毒(EBOV)核酸檢測試劑盒圖片品牌 | 48T | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球將試管塞緊后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數),振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環參數設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
PGF2α ELISA Kit博萊霉素水解酶抗體前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒
PGF ELISA Kit短蛋白聚糖抗體前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒
PGE2 ELISA KitBTB/POZ結構域蛋白3抗體前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒
PGE1 ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒
PTGDS ELISA Kit堿性亮氨酸拉鏈蛋白BZW1抗體前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒
PGDS ELISA Kit骨形態發生蛋白受體1B抗體前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒
PGD2 ELISA KitBcl2相互作用蛋白1抗體前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒
PGA1 ELISA Kit骨形態發生蛋白5抗體前列腺素A1(PGA1)ELISA試劑盒
PGI2 ELISA Kit骨形態發生蛋白15抗體前列環素(PGI2)ELISA試劑盒
PGI ELISA KitBcl-2樣蛋白2抗體前列環素(PGI)ELISA試劑盒
PGRN ELISA Kit殺菌/通透性增強蛋白抗體前顆粒蛋白(PGRN)ELISA試劑盒
PCOLCE1 ELISA KitBcl-2抗體前膠原C內肽酶增強子1(PCOLCE1)ELISA試劑盒
PCP ELISA Kit腦轉錄因子4蛋白抗體前膠原C端肽酶(PCP)ELISA試劑盒
Pim1 ELISA Kit膽鹽激活脂肪酶抗體前病毒整合位點1(Pim1)ELISA試劑盒
PA ELISA Kit3-羥丁酸脫氫酶抗體前白蛋白(PA)ELISA試劑盒
CALLA ELISA Kit長鏈脂肪酸酰基輔酶A水解酶抗體普通急性淋巴細胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒
GLUT4 ELISA Kit磷酸化癌易感基因1抗體葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)ELISA試劑盒
GLUT3 ELISA Kit磷酸化β分泌酶抗體葡萄糖轉運蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒
GLUT1 ELISA Kit磷酸化相關死亡促進因子抗體葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒
GIP ELISA Kit磷酸化相關死亡促進因子抗體葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒
GOD ELISA Kit磷酸化Bcl-2抗體葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒
GKRP ELISA Kit磷酸化癌易感基因1抗體葡萄糖激酶調節蛋白(GKRP)ELISA試劑盒
GCK ELISA Kit磷酸化癌易感基因1抗體葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒
GPI ELISA Kit磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體葡萄糖6磷酸異構酶(GPI)ELISA試劑盒
G6PD ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒
G-6-Pase ELISA Kit癌易感基因相互作用蛋白1抗體葡萄糖-6-磷酸酶/葡萄糖-6-磷酸酯酶(G-6-Pase)ELISA試劑盒
SPA ELISA Kit磷酸化癌易感基因相互作用蛋白1抗體葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒
PEPD ELISA Kit磷酸化相關死亡促進因子抗體脯氨酸肽酶(PEPD)ELISA試劑盒
PHD ELISA Kit磷酸化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒
SFPQ ELISA Kit磷酸化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體脯氨酸/谷氨酰胺富含性剪接因子(SFPQ)ELISA試劑盒
Tetanus Ab ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體破傷風抗體(Tetanus Ab)ELISA試劑盒
ODF ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒
PS ELISA Kit磷酸化Bcl-xL蛋白抗體潑尼松龍(PS)ELISA試劑盒
MDH1 ELISA Kit高表達神經上皮蛋白BTG3抗體蘋果酸脫氫酶1(MDH1)ELISA試劑盒
SMM ELISA KitB細胞遷移基因4抗體平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒
SMA ELISA KitBCL2相互
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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