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實驗中細胞爬片的免疫熒光操作步驟

時間:2017/6/13閱讀:1943
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1.取出ATCC細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里,PBS洗三遍。
 注意:有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心,注意 反正面,放在皿里洗比較方便,避免了來回夾取,另外洗的時候加PBS不要太沖,不要細胞沖下來。洗的時候我都是多加PBS,稍晃一下就倒掉,沒有等5分鐘或10分鐘。
2. 4%冷的多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。
3. 0.2%Triton X-100通透10分鐘,PBS洗三遍。
4. 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,PBS洗三遍。
5. 一抗4度濕盒內過夜,也可37度2小時,感覺前者效果好,PBS洗三遍。
6.二抗室溫2小時(避光),或者37度1半小時,PBS洗三遍。
7.用DAPI染核,然后直接照熒光片。
8.蒸餾水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周,因為甘油不象樹脂那樣會干,所以不用指甲油封的話會弄的一塌糊涂。
人成纖維細胞-新生兒cDNA    英文名稱:    HDF-n cDNA    ATCC細胞規格:    20 reactions        
人成纖維細胞-成人cDNA    英文名稱:    HDF-a cDNA    規格:    20 reactions        
人生發基質細胞cDNA    英文名稱:    HHGMC cDNA    規格:    20 reactions        
      
人淋巴內皮細胞cDNA    英文名稱:    HLEC cDNA    規格:    20 reactions        
人淋巴成纖維細胞cDNA    英文名稱:    HLF cDNA    規格:    20 reactions        
人口腔角質細胞cDNA    英文名稱:    HOK cDNA    規格:    20 reactions        
人牙齦成纖維細胞cDNA    英文名稱:    HGF cDNA    規格:    20 reactions        
人牙周膜成纖維細胞cDNA    英文名稱:    HPLF cDNA    規格:    20 reactions        
人食道上皮細胞cDNA    英文名稱:    HEEpiC cDNA    規格:    20 reactions        
人食道平滑肌細胞cDNA    英文名稱:    HESMC cDNA    規格:    20 reactions        
人腸微血管內皮細胞cDNA    英文名稱:    HIMEC cDNA    規格:    20 reactions        
人腸平滑肌細胞cDNA    英文名稱:    HISMC cDNA    規格:    20 reactions        
人結腸平滑肌細胞cDNA    英文名稱:    HCSMC cDNA    規格:    20 reactions        
人肺微血管內皮細胞cDNA    英文名稱:    HPMEC cDNA    規格:    20 reactions ATCC細胞       

 

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