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初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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如何選擇ATCC細(xì)胞術(shù)常用的熒光素 ?

時(shí)間:2018/4/12閱讀:219
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ATCC細(xì)胞儀測定常用的熒光染料有很多種,我們?nèi)绾蝸磉x擇ATCC細(xì)胞儀測定的常用熒光染料呢?以下簡單介紹了熒光素選擇的幾個(gè)原則。
1. 抗原的密度
① 高表達(dá)的抗原可選擇幾乎所有的熒光素;
② 低密度表達(dá)的抗原需要可提供較高S/N比值的熒光素如PE/APC。
2. 自發(fā)熒光
① 每種細(xì)胞群都有不同水平的自發(fā)熒光;
② 所有的熒光通道均可觀察到自發(fā)熒光,但自發(fā)熒光強(qiáng)度在波長較長時(shí)迅速降低;
③ 對(duì)自發(fā)熒光較強(qiáng)的細(xì)胞,選擇發(fā)射波長較長的熒光素(如APC)可得到較好的S/N比值;
④ 對(duì)自發(fā)熒光比較弱的細(xì)胞,發(fā)射波長較長的熒光素對(duì)S/N提高沒有明顯的改善。可選用FITC。 
3. ATCC細(xì)胞非特異結(jié)合
① 許多熒光抗體可產(chǎn)生低水平的非特異結(jié)合,使陰性細(xì)胞群的熒光超出自發(fā)熒光;
② 非特異結(jié)合由下列因素引起:
單克隆抗體的同型抗體:一些IgG同型抗體可能與一些細(xì)胞上的Fc受體結(jié)合;
所用的熒光素:羰花青染料(如CY3、CY5、CY5.5、CY7)和Tex-Red直標(biāo)的抗體及一些復(fù)合染料標(biāo)記的抗體在標(biāo)記某些亞群的細(xì)胞時(shí)有時(shí)會(huì)提高結(jié)合率;對(duì)CY5來說,是因?yàn)樵撊玖吓c低親和力Fc受體的極低親和力相互作用。這也是復(fù)合染料PE-CY5的特性。
110877-200001    含量測定    20mg    兒茶素
110878-200102    含量測定    20mg    表兒茶素
110879-200202    含量測定    20mg    腺苷
110882-200605    含量測定    20mg    木蘭脂素
110883-200502    含量測定    20mg    葫蘆巴堿
110886-200001    含量測定    20mg    腺嘌呤
110887-200202    薄層鑒別    20mg    尿苷
110888-200503    含量測定    20mg    環(huán)維黃楊星D
110889-200102    鑒別    100mg    蘇氨酸 
ATCC細(xì)胞

 

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