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呋喃唑酮檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1、將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出并將所需試劑從試劑盒取出,置室溫(20-25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、配液:將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水稀釋至800ml備用(或按需量稀釋),稀釋好的洗滌液在4℃
環(huán)境可保存一個(gè)月,使用前也需回溫。
3、取出板架及需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板重新密封,保存于2-8℃不要冷凍。
4、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品均需做2孔。
5、將濃縮抗體用已稀釋好的復(fù)溶液11倍稀釋(1份抗體加入10份稀釋液)。
6、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μl/孔,然后加已稀釋好的抗體50μl/孔,用蓋板膜蓋板,25℃環(huán)境中反應(yīng)60min,取出用洗滌液每孔加250ml,洗板5次,每次10秒,拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
7、加酶標(biāo)二抗:每孔加入100ml,用蓋板膜蓋板后置25℃環(huán)境中反應(yīng)30min。取出用洗滌液每孔加250ml,洗板5次,每次10秒,拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
8、顯色:每孔加入顯色劑A液50ml,再加B液50ml,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境中避光顯色30min。
9、測(cè)定:每孔加入終止液50ml,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定每孔OD值。
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