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乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥(HBV-YMDD) 核酸檢測試劑盒實驗要點

時間:2021/10/27閱讀:457
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乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥(HBV-YMDD) 核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)實驗要點:

1.CTAB 溶液在低于15℃時會析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預熱。  

2.在最適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 

3.雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性,但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和的混合液,可減輕這兩種現(xiàn)象,同時可加入適量的(苯酚——=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白質(zhì)層緊密,使水相和有機相分層較好。 細菌的培養(yǎng)和收集 將含有質(zhì)粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24 小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12 小時至對數(shù)生長后期。小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA 十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

試劑使用須知:

(1)請參照相關(guān)法規(guī)、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行安全操作。產(chǎn)品僅用于科研

(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。

(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關(guān)法律法規(guī)正當處理。

(4)購買后,請務必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。

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